靶向CK2α基因的siRNA对结肠癌HCT116细胞生长抑制作用及其机制

目的：探讨RNA干扰酪蛋白激酶2（CK2α）基因表达后对HCT116细胞生长的抑制作用并阐明其作用机制。方法：针对CK2α的mRNA序列设计CK2α-siRNA序列，将体外培养的HCT116细胞分为正常对照组(未转染)、阴性对照组(转染siRNA)和CK2α-siRNA组(转染CK2α-siRNA),应用Lipofectamine 2000进行转染，利用Western blotting 法检测CK2α、cyclin H、P53和P21蛋白表达水平；应用MTT法检测各组HCT116细胞增殖；采用流式细胞术检测细胞周期时相的分布。结果：与阴性对照组比较，CK2α-siRNA组CK2α和细胞周期蛋白cyclin H的表达水平明显降低（P<0.01），P53蛋白表达水平无明显变化（P>0.05），P21蛋白表达水平则明显升高（
P<0.01）；MTT检测，与阴性对照组比较，转染48和72 h，CK2α-siRNA组细胞存活率明显降低（P<0.01）；流式细胞术分析，与阴性对照组比较，CK2α-siRNA组S期细胞所占比例逐渐减少（P<0.01），G1期细胞则明显增加（P<0.01），细胞滞留在G1期。结论：RNA干扰CK2α表达能够抑制HCT116细胞增殖，发生G1期阻滞；其机制可能与RNA干扰CK2α表达后cyclin H表达下调及P53活性恢复有关。