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位点特异性PCR方法的建立及对近源种鹿茸药材的鉴别研究
引用本文:王学勇,刘春生,张蓉,黄璐琦,崔光红. 位点特异性PCR方法的建立及对近源种鹿茸药材的鉴别研究[J]. 中国中药杂志, 2009, 34(23): 3013-3016
作者姓名:王学勇  刘春生  张蓉  黄璐琦  崔光红
作者单位:1. 北京中医药大学,中药学院,北京,100102
2. 中国中医科学院,中药研究所,北京,100700
基金项目:《中国药典》2010版一部标准研究项目(YD-195-1)
摘    要:目的:针对正品鹿茸与近源种鹿茸药材饮片鉴别的难点,建立一种简便、快速、准确的近源种鹿茸药材分子鉴别方法.方法:根据鹿科鹿属种动物cytb全序列比对分析,设计1对能准确鉴别正品鹿茸(包括梅花鹿和马鹿)和其他近源种鹿茸的引物,在此基础上建立鹿茸药材位点特异性PCR鉴别方法,并对影响PCR结果的主要因素退火温度、Taq用量、循环次数以及模板用量和重复性等进行方法学考察和优化.结果:在方法学考察的基础上,在μL PCR反应体系,退火温度为65℃的条件下,能准确扩增出约323 bp大小的阳性DNA条带,经测序验证结果表明,系正品鹿茸原动物的Cytb基因序列片段,而伪品鹿茸未扩增出条带.结论:所建立的位点特异性PCR方法,能将正品鹿茸与其他近源种鹿茸药材鉴别开来,具有较高的特异性、重复性,可广泛应用于鹿类药材的鉴别.

关 键 词:位点特异性PCR  近源种鹿茸药材  鉴别
收稿时间:2009-06-15

Establishment of allele-specific diagnostic PCR method for identification of antlers
WANG Xueyong,LIU Chunsheng,ZHANG Rong,HUANG Luqi and CUI Guanghong. Establishment of allele-specific diagnostic PCR method for identification of antlers[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2009, 34(23): 3013-3016
Authors:WANG Xueyong  LIU Chunsheng  ZHANG Rong  HUANG Luqi  CUI Guanghong
Abstract:
Keywords:Allele-specific diagnostic PCR   antlers from closely relate species of Cervus   identification
本文献已被 万方数据 等数据库收录!
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