IFN-γ基因修饰的肿瘤细胞来源exosomes的抗肿瘤效应 |
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作者姓名: | 杨云山 钟海均 修方明 蔡志坚 |
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作者单位: | 1. 浙江省肿瘤医院,浙江,杭州,310022 2. 浙江大学免疫学研究所,浙江,杭州,310058 |
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基金项目: | 浙江省医药卫生科学研究基金 |
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摘 要: | [目的]探讨IFN-γ基因修饰的肿瘤细胞来源的exosomes体内抗肿瘤效应。[方法]通过密度梯度离心和蔗糖密度梯度法分离纯化E.G7-OVA肿瘤细胞分泌的exosomes。用表达小鼠IFN-γ基因的腺病毒载体AdIFN-γ和对照载体AdLacZ感染E.G7-OVA肿瘤细胞。将AdIFN-γ基因修饰的E.G7-OVA细胞来源的exosomes命名为Exo/IFN-γ,AdLacZ感染E.G7.OVA细胞及E.G7-OVA细胞来源的exosomes分别命名为Exo/LacZ和Exo。用这些exosomes免疫小鼠.观察其抗肿瘤效应.并探讨其作用机制。[结果]电镜下exosomes为双层膜结构,呈特征性的“盘状”结构,直径在40~100nm之间。通过Western印迹,在制备的Exo/IFN-γ中检测到IFN-γ,而在Exo/LacZ未检测到IFN-γ。与对照组PBS相比,用Exo、Exo/LacZ免疫小鼠分别能导致20%和30%小鼠90d无瘤(P=0.0008),而用Exo/IFN-γ免疫小鼠则能导致60%小鼠90d无瘤(P=0.0001);CTL表明,Exo/IFN-γ免疫诱导的CTL活性明显高于Exo和Exo/LacZ(P=0.0083)。[结论]INF-γ基因转染的E.G7-OVA肿瘤细胞来源的exosomes含有IFN-γ,且Exo/IFN-γ具有比常规exosomes更显著的抗肿瘤效应。
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关 键 词: | IFN-γ基因 E.G7.OVA细胞 exosomes 抗肿瘤效应 |
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