| 基于CRISPR/Cas13a技术检测肿瘤驱动基因TP53R248W的研究 |
| |
| 引用本文： | 邝振展,肖斌,孙朝晖,罗镕,何洁雯,李林海. 基于CRISPR/Cas13a技术检测肿瘤驱动基因TP53R248W的研究[J]. 南京医科大学学报(自然科学版), 2022, 42(8): 1119-1124 |
| |
| 作者姓名： | 邝振展 肖斌 孙朝晖 罗镕 何洁雯 李林海 |
| |
| 作者单位： | 中国人民解放军南部战区总医院检验科,广东 广州 510010;广州医科大学附属第六医院(清远市人民医院)检验医学部,广东 清远 511518;广州医科大学金域检验学院,广东 广州 510180;广州南方学院云康医学与健康学院,广东 广州 510970 |
| |
| 基金项目： | 全军保健专项科研课题(18BJZ4);广东省医学科学技术研究基金项目(B2019139);全军卫勤保障能力创新与生成项目(20WQO29);后勤科研开放项目(BLB19J009) |
| |
| 摘 要： | 目的：建立一种基于 CRISPR/Cas13a 的 TP53 R248W 变异体的快速检测技术。方法：根据 Over?lap PCR 技术,以 TP53野生型质粒为模板构建TP53 R248W变异体质粒;对TP53R248W变异体扩增产物大小,扩增反应条件及crRNA长度和浓度进行优化,初步建立基于CRISPR/Cas13a的R248W变异体快速检测方法;利用不同突变率TP53 R248W变异体及模拟血浆 ctDNA,评价 CRISPR/Cas13a 方法的检测灵敏度。结果：建立的 CRISPR/Cas13a 方法成功检测出产物大小为 368 bp 的 TP53 R248W片段;在0.05~0.25 μmol/L浓度范围内,crRNA浓度越高,检测结果相对荧光值越高;该方法检测TP53 R248W变异体的灵敏度为1×104 拷贝/μL,最低可以检测出突变率为0.01%的变异体。结论：建立的CRISPR/Cas13a方法具有快速、简便、灵敏、 特异等优点,为组织和血浆中的TP53 R248W变异体的检测提供了新的技术手段。
|
| 关 键 词： | CRISPR/Cas13a TP53 R248W crRNA 快速检测 |
Detection of tumor driver gene TP53 R248W by CRISPR/Cas13a |
| |
| KUANG Zhenzhan,XIAO Bin,SUN Zhaohui,LUO Rong,HE Jiewen,LI Linhai. Detection of tumor driver gene TP53 R248W by CRISPR/Cas13a[J]. Acta Universitatis Medicinalis Nanjing, 2022, 42(8): 1119-1124 |
| |
| Authors: | KUANG Zhenzhan XIAO Bin SUN Zhaohui LUO Rong HE Jiewen LI Linhai |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
|
| 点击此处可从《南京医科大学学报(自然科学版)》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《南京医科大学学报(自然科学版)》下载全文 |
|
