藤黄酸对非小细胞肺癌EGFR-TKI 耐药细胞H1975耐药的逆转作用及机制探讨

目的：观察藤黄酸（GA） 联合埃克替尼（Icotinib） 对非小细胞肺癌（NSCLC） 表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKI） 耐药细胞H1975 增殖的影响，探讨GA 逆转耐药可能的作用机制。方法：通过持续诱导的方式建立EGFR-TKI 耐药细胞株H1975，采用MTT 法检测单用埃克替尼、单用GA 与二者联用对耐药细胞株H1975 细胞增殖的影响；Annexin V-FITC/PI 双染色法检测药物处理对耐药细胞株H1975 细胞凋亡的影响；Transwell 实验检测药物处理对耐药细胞株H1975 细胞迁移的影响；Western blot 法检测药物处理对耐药细胞株H1975 细胞蛋白表达的影响。结果：①单独应用GA 与埃克替尼对耐药细胞株H1975 细胞增殖的抑制效果呈浓度依赖性，即药物浓度越高抑制效果越强。GA 联合埃克替尼对耐药细胞株H1975 细胞增殖的抑制效果显著强于单独应用埃克替尼（P＜0.05）。②单独应用GA 与埃克替尼诱导耐药细胞株H1975 细胞凋亡效果与空白组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；GA 联合埃克替尼可以有效促进耐药细胞株H1975 细胞凋亡，其效果显著优于单独药物处理（P＜0.05）。③单独应用GA 与埃克替尼对耐药细胞株H1975 细胞迁移无显著影响（P＞0.05），GA 联合埃克替尼可以有效抑制耐药细胞株H1975 细胞迁移，其效果显著优于单独药物处理（P＜0.05）。④GA 联合埃克替尼组磷酸化表皮生长因子受体（p-EGFR）、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）、磷酸化细胞外调节蛋白激酶（p-ERK） 蛋白表达量均显著低于空白组、埃克替尼组与GA 组（P＜0.05）。结论：GA 联合埃克替尼可以有效抑制EGFR-TKI 耐药细胞H1975 增殖，并抑制细胞迁移，诱导细胞凋亡，对肺癌EGFR-TKI 耐药起到逆转作用，其具体作用机制可能与抑制EGFR 信号通路分子磷酸化，调节蛋白表达有关。

Discussion on Reversal Effects of Drug Resistance and Mechanism of Gambogic Acid on Non-Small Cell Lung Cancer H1975 Cells Being Resistant to EGFR-TKI