去甲斑蝥素通过ROS途径诱导A431细胞凋亡

摘要] 目的：探讨去甲斑蝥素（Norcantharidin，NCTD）对人A431细胞增殖能力、细胞凋亡及Bcl-2,bax,Caspase-3,Caspase-9表达的影响。方法：MTT法检测NTCD对细胞增殖作用的影响，用ROS检测试剂盒检测NCTD对细胞活性氧表达的影响，JC-1试剂盒检测膜电位变化，Hoehst33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡的变化，酶活性试剂盒检测Caspase-3,Caspase-9的表达；Western blot方法检测NTCD 对A431细胞Bcl-2,bax蛋白表达水平的影响。结果：NTCD作用48h,与对照组相比，NTCD能明显抑制细胞的增殖能力（P<0.05）,明显提高细胞内的活性氧水平，NCTD能促使A431细胞细胞膜电位下降，并能诱导细胞出现明显的凋亡，同时，细胞经NTCD作用后，Bcl-2,bax蛋白表达水平明显上调，Caspase-3,Caspase-9酶活性明显增加。结论：NTCD能提高细胞内活性氧水平，引起细胞膜电位下降并诱导细胞凋亡。NCTD诱导A431发生凋亡的机制可能与它能通过上调Bcl-2,bax蛋白表达水平，增加Caspase-3,Caspase-9酶活性相关。