| 靶向HOXA9基因RNAi慢病毒载体增加人急性单核细胞白血病U937细胞的药物敏感性 |
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| 引用本文： | 朱立平,贾秀红,李建厂.靶向HOXA9基因RNAi慢病毒载体增加人急性单核细胞白血病U937细胞的药物敏感性[J].肿瘤,2013,33(1):21-27. |
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| 作者姓名： | 朱立平 贾秀红 李建厂 |
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| 作者单位： | 滨州医学院附属医院儿科,山东滨州,256603 |
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| 基金项目： | 山东省科学技术发展计划项目 |
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| 摘 要： | 目的:探讨慢病毒载体介导的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)沉默同源盒A9(homeobox A9,HOXA9)基因对人急性单核细胞白血病U937细胞药物敏感性的影响。方法:应用蛋白质印迹法从4条针对HOXA9基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体中筛选出1条敲减效率最高的包装成慢病毒HOXA9/GV118RNAi-LV#2。实验分成未感染对照组(control,CON)、阴性对照组(negative control,NC)及敲减组(knock down,KD)。HOXA9/GV118RNAi-LV#2感染U937细胞后,应用实时荧光定量PCR法检测HOXA9 mRNA的沉默效率,蛋白质印迹法检测HOXA9蛋白的表达,MTT法和FCM检测病毒感染前后U937细胞对长春新碱(vincristine,VCR)和柔红霉素(daunorubicin,DNR)的敏感性及细胞凋亡率变化,RT-PCR法检测DNR作用后各组细胞中MDR-1mRNA的表达。结果:KD组细胞中HOXA9mRNA的沉默效率在55%以上,HOXA9蛋白的表达量明显减少。VCR及DNR作用KD组细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值明显降低(P<0.01),药物敏感性明显增强;VCR和DNR作用后,KD组细胞的凋亡率明显增加(P<0.01);DNR作用后,KD组U937细胞中MDR-1mRNA的表达水平明显下调(P<0.01)。结论:靶向HOXA9基因的RNAi慢病毒可稳定沉默HOXA9基因的表达,在一定程度上提高U937细胞对化疗药物的敏感性。
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| 关 键 词： | 白血病 慢病毒 RNA干扰 抗药性 肿瘤 基因 HOXA9 细胞 U937 |
Lentivirus-mediated shRNA targeting homeobox A9 gene enhances drug sensitivity of human acute monocytic leukemia U937 cells |
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| ZHU Li-ping
,
JIA Xiu-hong
,
LI Jian-chang.Lentivirus-mediated shRNA targeting homeobox A9 gene enhances drug sensitivity of human acute monocytic leukemia U937 cells[J].Tumor,2013,33(1):21-27. |
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| Authors: | ZHU Li-ping JIA Xiu-hong LI Jian-chang |
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| Institution: | Department of Pediatrics, Affiliated Hospital of Binzhou Medical College, Binzhou 256603, Shandong Province, China |
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