| 脂质体介导TGF-β1 shRNA转染的方法 |
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| 引用本文： | 王守立,姚辉华,董亮,邓敏,顾永平,孙茂民.脂质体介导TGF-β1 shRNA转染的方法[J].苏州大学学报(自然科学版),2008,28(2):222-226. |
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| 作者姓名： | 王守立 姚辉华 董亮 邓敏 顾永平 孙茂民 |
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| 作者单位： | [1]苏州大学医学部病理学教研室 [2]苏州大学医学部人体解剖学教研室,江苏苏州215123 [3]苏州大学附属第二医院普外科,江苏苏州215004 |
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| 基金项目： | 江苏省自然科学基金
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江苏省高校自然科学基金
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江苏省资助经费招收博士后基金 |
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| 摘 要： | 目的 探讨脂质体介导的转化生长因子β1(TCF-β1)短发夹RNA(shRNA)在人肿瘤细胞株的转入效率,为研究TGF-β1信号转导在肿瘤微环境中的作用机制提供方法依据.方法 化学合成TGF-β1小干扰RNA(siRNA),与脂质体转染介质混合制备转染复合物(Lip-shRNA),处理细胞24h后用流式细胞术(FCM)及人工计数法测定RD细胞的转入率;免疫荧光技术检测细胞TGF-β1蛋白表达水平.结果 荧光显微镜观察硫代磷酸化修饰的寡核苷酸转入4h后,shRNA主要定位在细胞浆,8h后细胞核中有较多的shRNA;FCM测得转入细胞转入率与Lip-shRNA复合物呈剂量依赖关系,人工测得shRNA的转入率与转入复合物在低剂量呈剂量依赖关系,但在高剂量时增高不明显.转人6d后各组细胞TGF-β1蛋白表达量较转入3d时明显减少,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 脂质体介导的TGF-β1shRNA在常见肿瘤细胞株中的转入效率与寡核苷酸的稳定性、Lip-shRNA复合物剂量、转入时间密切相关,该转染技术可以作为RNA干扰手段研究TGF-β1信号转导的病理学机制.
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| 关 键 词： | RNA干扰 TGF-β1 肿瘤微环境 方法 脂质体介导 shRNA 转染 方法 Method of Liposomes Mediated 病理学 手段 干扰 相关 转入时间 稳定性 肿瘤细胞株 统计学意义 差异 比较 对照组 蛋白表达量 转人 |
| 文章编号： | 1673-0399(2008)02-0222-04 |
| 修稿时间： | 2007年11月16 |
The Method of TGF-β1 shRNA Transfection Efficiency Mediated by Liposomes |
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| WANG Shou-li,YAO Hui-hua,DONG Liang,DENG Min,GU Yong-ping,SUN Mao-min.The Method of TGF-β1 shRNA Transfection Efficiency Mediated by Liposomes[J].Suzhou University Journal of Medical Science,2008,28(2):222-226. |
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| Authors: | WANG Shou-li YAO Hui-hua DONG Liang DENG Min GU Yong-ping SUN Mao-min |
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| Institution: | WANG Shou-li1,YAO Hui-hua2,DONG Liang1,DENG Min1,GU Yong-ping1,SUN Mao-min3 (1.Dept of Pathology,3. Dept of Anatomy,Medical College,Suzhou University,Jiangsu Suzhou 215123,China,2.Dept of General Surgery,the Second Hospital Affiliated to Suzhou University,Jiangsu Suzhou 215004,China) |
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| Abstract: | |
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