去氢甲睾酮抗体的制备与鉴定

目的:制备兔抗去氢甲睾酮(DMT)抗体,为采用免疫法分析食品中该激素的残留提供基础。方法:采用碳二亚胺法将肟化后的DMT分别偶联到钥孔血蓝蛋白、鸡卵清蛋白和牛血清白蛋白蛋白载体上,制备完全抗原,并利用薄层层析法、红外和紫外光谱法对其进行确证后,免疫新西兰大白兔;通过间接ELISA法测定和比较2种兔抗血清的效价、IC50及交叉反应率。结果:成功制备了DMT的完全抗原,其抗体效价分别为1∶64000(KLH-DMT)和1∶256000(OVA-DMT),IC50值分别为0.24μg/L和5.29μg/L;抗血清与丙酸睾酮酯、群勃龙的IC50值均大于781.25μg/L。结论:制备的DMT完全抗原具有较高的免疫原性,抗体与类似物丙酸睾酮酯、群勃龙无明显的交叉反应,可用于ELISA实验。