高海拔西藏地区辅助生殖技术培养条件中CO_2浓度的初步研究

目的在西藏拉萨(海拔约3 650m)研究开展人类辅助生殖技术(ART)所需的胚胎实验室培养条件,为西藏地区广大不孕不育夫妇提供ART治疗奠定基础。方法利用血气分析仪检测COOK培养液(受精液、卵裂液、囊胚液)在不同CO2浓度下(4.5%~7.0%)平衡不同时间(12h、24h、48h、72h)后的pH值和HCO-3浓度变化情况,选择COOK培养液所需的最佳CO2浓度,并利用鼠胚实验进一步验证胚胎培养环境的可靠性。结果 (1)在所测试的CO2浓度范围内,COOK培养液pH值随着CO2浓度的增加呈整体下降趋势,随着平衡时间的延长呈逐渐上升趋势。(2)在4.5%、5.0%、5.5%的CO2浓度下平衡12h、24h、48h、72h后,COOK受精液、卵裂液pH值均在厂商提供的使用范围内(7.3~7.5),囊胚液平衡48h后pH接近7.3。(3)对比4.5%和5.0%CO2浓度组培养箱中鼠胚培养情况,结果显示4.5%CO2浓度组鼠胚发育较5.0%CO2浓度组差异显著(受精率75.24%vs.67.63%、2细胞转囊胚率61.94%vs.49.29%)(P0.01)。结论海拔3 650m的胚胎实验室使用COOK培养液时,在4.5%CO2浓度下平衡后,培养液的pH值波动较小,同时鼠胚发育情况良好,达到开展ART技术所需的胚胎实验室的胚胎培养条件;另外,COOK培养液pH值在7.3~7.5之间所需的CO2浓度低于内地,与厂商所提供的随着海拔的升高而增加并不相符。后期仍需进一步摸索海拔和培养液所需CO2浓度之间的关系。

Pilot study of optimal CO2 concentration in culture condition for assisted reproductive technology at high altitude in Tibet