| MicroRNA在建立DJ-1基因敲减细胞模型中的应用 |
| |
| 引用本文： | 赵莎莎,鲁玲玲,高华,吕瓅,赵焕英,杨慧.MicroRNA在建立DJ-1基因敲减细胞模型中的应用[J].基础医学与临床,2011,31(5):515-519. |
| |
| 作者姓名： | 赵莎莎 鲁玲玲 高华 吕瓅 赵焕英 杨慧 |
| |
| 作者单位： | 首都医科大学,神经生物学系,北京神经科学研究所,北京市神经再生修复研究重点实验室神经变性病教育部重点实验室,北京,100069 |
| |
| 基金项目： | 国家"973"计划，国家"863"计划，北京市自然科学基金，国家自然科学基金，北京市优秀人才培养项目，北京市高校人才强教创新团队计划 |
| |
| 摘 要： | 目的 与传统的siRNA方法建立基因敲减模型不同，探讨合成microRNA(miRNA)在DJ-1基因敲减细胞模型中的应用。方法 构建针对DJ-1基因的合成miRNA载体，合成DJ-1基因的siRNA干扰片断。在脂质体介导下，将上述两种小干扰RNA载体或片断分别转染MN9D细胞系，应用real-time PCR和Western blots检测目的基因DJ-1的mRNA和蛋白表达。结果 与Control组相比，转染合成microRNA的MN9D细胞中，DJ-1的mRNA水平下调90%（p<0.05），蛋白水平下调70%~85%(p<0.05)；而转染siRNA的MN9D细胞中，DJ-1的mRNA水平下调50%~70%（p<0.05）,蛋白水平下调20%~50%（p<0.05）。结论 microRNA与siRNA均可作为基因敲减的重要研究手段。与传统的siRNA相比，合成microRNA对目的DJ-1的干扰效率更为显著。
|
| 关 键 词： | DJ-1 microRNA siRNA RNA干扰 |
Application of two types of RNA to develope DJ-1 knockdown cell model |
| |
| ZHAO Sha-sha,LU Ling-ling,GAO Hua,L Li,ZHAO Huan-ying,YANG Hui.Application of two types of RNA to develope DJ-1 knockdown cell model[J].Basic Medical Sciences and Clinics,2011,31(5):515-519. |
| |
| Authors: | ZHAO Sha-sha LU Ling-ling GAO Hua L Li ZHAO Huan-ying YANG Hui |
| |
| Institution: | ZHAO Sha-sha,LU Ling-ling,GAO Hua,L(U) Li,ZHAO Huan-ying,YANG Hui |
| |
| Abstract: | Objective To develope gene knockdown cell model with artificial microRNA in setting up gene knockdown cell model.Methods We constructed vectors,and prepared siRNA fragments targeting on DJ-1.Then we transciently transfected the artificial miRNA and siRNA into MN9D cells by lipofectamine2000 reagent,the mRNA and protein expression level of DJ-1 gene were detected by RT-PCR and Western blot.Results Compared with control group,DJ-1 expression level was significantly decreased in both artificial miRNA and siRNA... |
| |
| Keywords: | DJ-1 microRNA siRNA |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《基础医学与临床》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《基础医学与临床》下载免费的PDF全文 |
|
