| DNA微阵矩分析人软骨细胞体外老化过程中基因表达水平的变化 |
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| 引用本文： | 张艳,柴岗,刘伟,崔磊,曹谊林. DNA微阵矩分析人软骨细胞体外老化过程中基因表达水平的变化[J]. 中华创伤骨科杂志, 2004, 6(12): 1365-1369 |
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| 作者姓名： | 张艳 柴岗 刘伟 崔磊 曹谊林 |
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| 作者单位： | 200011,上海市,上海第二医科大学第九人民医院整复外科,上海市组织工程重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家“973”组织工程研究项目04项子课题(G1999054304)，上海市科委:软骨组织工程的临床应用(00DJ14001-1) |
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| 摘 要： | 目的 研究成人软骨细胞体外单层培养老化过程中基因表达水平的变化，初步探索人软骨细胞老化发生的可能机制。方法 取体外培养的第1代(P)至第4代(P4)人肋软骨细胞，观察细胞增殖率，阿利新兰(Alcian blue)法定量检测硫酸软骨素蛋白聚糖聚集体(aggrecan)中糖胺多糖(GAGs)含量，RT-PCR分析Ⅰ、Ⅱ型胶原及aggreean基因表达量，以观察人软骨细胞体外老化过程。并采用DNA微阵矩技术对P1及P4软骨细胞表达差异的基因进行比较分析，P1及P4人肋软骨细胞基因表达水平差异≥2倍时，被认为差异具有显著性。结果 P4软骨细胞从细胞增殖率，细胞中GAGs含量，Ⅱ型胶原及aggrecan基因表达量分析均明显低于P1软骨细胞(P＜0．01)。在1000点的含有原癌基因、抑癌基因、细胞凋亡、应激反应蛋白基因和免疫相关基因的芯片分析中，P1及P4间存在差异的基因共36个，其中在P4中下调的基因11个，主要为细胞外基质、生长因子转录因子等，而在P4中上升的基因共25个主要为蛋白酶类、炎症因子及凋亡相关基因等。结论 P4软骨细胞呈现老化特征，通过DNA微阵矩技术发现P4老化细胞中基质合成相关基因表达下降，而降解酶类基因表达上升，致细胞外基质减少。且细胞增殖有关基因表达的减少及凋亡因子的增加，老化细胞增殖率下降；
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| 关 键 词： | 软骨细胞 体外 基因表达水平 肋软骨 细胞增殖率 Ⅱ型胶原 细胞外基质 DNA 表达量 RT-PCR分析 |
| 文章编号： | 1671-7600(2004)12-1365-05 |
| 修稿时间： | 2004-03-26 |
Microarray analysis of age-related gene expression of human chondrocytes cultured in vitro |
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| ZHANG Yan,CHAI Gang,LIU Wei,CUI Lei,CAO Yi-lin. Microarray analysis of age-related gene expression of human chondrocytes cultured in vitro[J]. Chinese Journal of Orthopaedic Trauma, 2004, 6(12): 1365-1369 |
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| Authors: | ZHANG Yan CHAI Gang LIU Wei CUI Lei CAO Yi-lin |
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| Affiliation: | ZHANG Yan,CHAI Gang,LIU Wei,CUI Lei,CAO Yi-lin Department of Plastic Surgery,Nint h People' s Hospital,Shanghai Second Medical University,Shanghai Key Laboratory of Tissue Engineering,Shanghai Tissu e Engineering Center,Shanghai 200011,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Chondrocytes Aging Microarray G ene |
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