小鼠肾脏缺血-再灌注损伤miRNAs差异表达谱研究

目的  筛选小鼠肾脏缺血-再灌注损伤（IRI）差异性表达的微小核糖核酸（miRNAs），为进一步深入阐明肾脏IRI发生、发展的分子机制奠定基础。方法  应用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾动脉制备急性肾缺血损伤模型，将15只小鼠分为IRI组和假手术组（E组），IRI组再分为A组（缺血时间45 min，再灌注时间24 h）、B组（缺血时间25 min，再灌注时间24 h）、C组（缺血时间45 min，再灌注时间4 h）、D组（缺血时间25 min，再灌注时间4 h），每组3只。采用肾脏组织形态学改变和肾功能评估结果来鉴定各组小鼠的IRI程度；采用miRNAs芯片聚类分析对小鼠IRI特定缺血时间（25、45 min）和再灌注时间（4、24 h）下肾脏差异性表达差异表达的miRNAs进行筛选鉴定；采用实时定量逆转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）对小鼠IRI后差异表达miRNAs芯片miR-695与miR-145进行验证。结果  肾脏组织形态学改变和肾功能评估结果显示成功建立IRI模型。与假手术组相比，肾脏IRI组共检出71种差异性表达显著的miRNAs，其中30种下调表达，41种上调表达。qRT-PCR法检测结果表明，以E组特定miRNAs的表达量标准化为1，miR-695及miR-145在肾脏IRI组的相对表达量分别为11.82和0.31（均为P＜0.05），与芯片结果基本一致。结论  肾脏IRI后，miRNAs表达谱发生差异性改变，这些差异性表达的miRNAs将可作为肾脏IRI的分子标志物而具有潜在的临床及科研应用价值。

Differential gene expression profile of miRNAs in mouse models with renal ischemia-reperfusion injury