电刺激嗅球对脑缺血再灌注大鼠内源性神经干细胞增殖、迁移及分化的影响

目的：探讨嗅球电刺激对脑缺血再灌注大鼠脑内神经发生的影响。方法将健康雌性SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组、电刺激组、假刺激组，其中脑缺血再灌注组、电刺激组，以线栓法建立大鼠右侧大脑中动脉缺血（middle cerebral artery occlusion ，MCAO）/再灌注模型，假手术组仅分离出颈内动脉；电刺激组在右侧嗅球内埋置双极电极，于MCAO再灌注后对嗅球进行电刺激，假刺激组只埋置电极，不进行电刺激；以5－溴脱氧尿嘧啶（Brdu）标记内源性神经干细胞（NSC ）。假手术组于术后48 h、1周，脑缺血再灌注组于缺血再灌注后48 h、1周，电刺激组及假刺激组于刺激后48 h、1周分别行Brdu免疫组化染色，观察各组脑室下区（SVZ）区NSC增殖情况；假手术组、缺血再灌注组、电刺激组、假刺激组4组大鼠在电刺激组行电刺激后腹腔注射Brdu 50 mg/kg ，2次/d ，连续2 d ，4周后处死，分别取脑切片，进行免疫组化和免疫荧光双标染色，观察各组NSC迁移和分化情况。结果缺血再灌注组（37.67±1.97）、假刺激组（36.5±2.35）和电刺激组（43.67±1.63）大鼠48 h后SVZ区Brdu阳性NSC细胞数较假手术组（15.5±1.52）明显增多（F＝57.21，P＜0.05），缺血再灌注组（41.17±2.94）、假刺激组（41.83±2.14）和电刺激组（47.67±2.34）1周后Brdu阳性细胞数较假手术组（15.5±1.52）增多（F＝73.62，P＜0.01），电刺激组在各时间点均较其他组Brdu阳性 NSC细胞数增多（P＜0.01）。缺血并注射Brdu 4周后缺血侧皮质区电刺激组Brdu阳性NSC细胞数（57.17±2.4）较缺血再灌注组（46.83±2.48）和假刺激组（45.83±2.14）增多（F＝161.50，P＜0.01）；免疫荧光双标染色示电刺激组Brdu阳性NSC细胞中Brdu/神经元核抗原（Neun ）双阳性细胞比例约为（74.67±3.61）％，Brdu/胶质纤维酸性蛋白（GFAP）双阳性细胞比例约为（38.83±3.36）％，与缺血再灌注组和假刺激组比较差异均无统计学意义（均 P＞0.05）。结论电刺激嗅球可能促进脑缺血大鼠SVZ区NSC增殖，并可能促进新生NSC向缺血皮质区迁移，增加缺血皮质新生神经元数量，但SVZ区新生NSC的分化不受影响。

The effect of electrical stimulation of olfactory bulb on neurogenesis after ischemia/reperfusion injury in rats