长白山地区药用植物龙胆DNA条形码鉴定

目的：基于内转录间隔区2（internal transcribed spacer 2，ITS2）碱基序列，运用DNA条形码鉴定技术对长白山地区药用植物龙胆进行鉴别研究，为龙胆药材的基原植物鉴定和药材的真伪鉴别提供参考。方法：采用十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）提取法提取龙胆叶片及药材的DNA，对其中特定ITS2碱基序列进行聚合酶链式反应（PCR）扩增，检测后测序，并从GenBank下载同属植物序列，运用SeqMan软件对碱基序列拼接后，采用MEGA 7.0软件对数据进行分析处理及对比，计算Kimura 2-parameter （K2P）遗传距离，建立邻接（NJ）法，进行对比分析。结果：根据NJ聚类树可知，不同种龙胆属植物笔龙胆、三花龙胆、高山龙胆、坚龙胆都自为一支，区分明显，龙胆和条叶龙胆聚在一支未能区分开，同时结合变异位点及K2P遗传距离发现，条叶龙胆和龙胆应用ITS2碱基序列区分时种间差异十分小。吉林省长白山10个不同地区的龙胆种内几乎无差异，经Blast比对确定碱基序列的确为所需要鉴定的品种。结论：运用ITS2碱基序列的DNA分子条形码鉴别方法对龙胆植物及药材进行鉴别有效可行且成功率较高，可以用于龙胆属种间及种内鉴别。

DNA Barcoding Identification of Gentiana scabra in Changbai Mountains