基于高内涵细胞成像系统研究黄芩苷对人肺癌A549 细胞上皮间质转化模型的影响

目的基于高内涵细胞成像系统（HCS）探讨黄芩苷（Baicalin）对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的人肺癌 A549 细胞上皮间质转化（EMT）的影响。方法体外培养人肺癌A549 细胞，用TGF-β1 诱导A549 细胞发生上 皮间质转化，设立空白对照组（TGF-β1 0 ng·mL-1）、TGF-β1 模型组（TGF-β1 5 ng·mL-1）和黄芩苷干预组 （TGF-β1 5 ng·mL-1 +黄芩苷5、10、20 μmol·L-1）。采用MTT 法检测黄芩苷对A549 细胞活性的影响；以 TGF-β1 诱导人肺癌A549 细胞发生上皮间质转化，并加入不同浓度黄芩苷干预，采用HCS 分析细胞肌动蛋白 应激纤维（F-actin）纹理强度、细胞面积、细胞圆度和细胞长度等形态学变化，以及细胞黏附能力和运动迁移能 力变化；RT-qPCR 法检测上皮间质转化相关标志基因Collagen I、FN1、Vimentin 和E-cadherin 的相对表达 量。结果黄芩苷干预A549 细胞48 h 后半数抑制浓度（IC50）为22.59 μmol·L-1。HCS 分析结果显示，与空白对 照组比较，TGF-β1 模型组细胞形态呈间质细胞样（纺锤形）变化，F-actin 纹理强度增强（P＜0.01），细胞长度 和细胞面积增大（P＜0.01），细胞圆度减小（P＜0.01），黏附率降低（P＜0.01），迁移率和迁移速度升高（P＜ 0.01）；与TGF-β1 模型组比较，黄芩苷干预组细胞形态呈上皮细胞样（不规则多边形）变化，F-actin 纹理强度 减弱（P＜0.05，P＜0.01），细胞长度和细胞面积减小（P＜0.01），细胞圆度增大（P＜0.01），黏附率升高（P＜ 0.01），迁移率和迁移速度降低（P＜0.05，P＜0.01）。RT-qPCR 结果表明，与空白对照组比较，TGF-β1 模型组 Collagen Ⅰ、FN1 和Vimentin 的mRNA 相对表达量升高（P＜0.01），E-cadherin 的mRNA 相对表达量降低（P＜ 0.01）；与TGF-β1 模型组比较，黄芩苷干预组Collagen I、FN1 和Vimentin 的mRNA 相对表达量降低（P＜ 0.05，P＜0.01），E-cadherin 的mRNA 相对表达量升高（P＜0.05，P＜0.01）。结论黄芩苷能够有效阻止 TGF-β1 诱导的人肺癌A549 细胞上皮间质转化进程，提示HCS 是一种多参数系统分析细胞上皮间质转化的有 效工具。