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| 人重组核凋亡诱导因子1截短体在大肠杆菌中的表达及纯化 | |
| 引用本文： | 韩普,莫晓宁,钟丽君,杨彬,马大龙,娄雅欣.人重组核凋亡诱导因子1截短体在大肠杆菌中的表达及纯化[J].中国免疫学杂志,2006,22(11):979-982. |
| 作者姓名： | 韩普 莫晓宁 钟丽君 杨彬 马大龙 娄雅欣 |
| 作者单位： | 1. 北京大学人类疾病基因研究中心,北京,100083 2. 北京大学医药卫生分析中心蛋白质组,北京,100083 3. 北京大学医学部基础医学院免疫系,北京,100083 |
| 摘 要： | 目的：核凋亡诱导因子1（Nuclear apoptosis—inducing factorj，NAIF1）是本实验室首次克隆和鉴定的新凋亡基因，为了通过Polldown实验研究其结合蛋白，在大肠杆菌中表达和纯化人重组NAIF1（73-327）的截短体。方法：通过PCR方法扩增出NAIF1（73—327）cDNA，并插入pGEX—KG载体，实现插入基因的融合表达，对表达产物进行SDS—PAGE、Western blot和电喷雾电离-四极杆-飞行时间质谱（ESI—Q-TOF—MS／MS）检测分析。结果：DNA测序结果证实成功构建了重组融合表达质粒pGEX—KG—NAIF1（73-327），并在大肠杆菌中稳定表达，表达产物分子量约为53kD，与预期一致，表达量约占菌体总蛋白的22％，纯化蛋白经Western blot和二级质谱（MS／MS）分析证明表达蛋白为GST—NAIF1（73-327）融合蛋白。结论：获得了重纩GST—NAIF1（73-327）融合蛋白的高效表达，为下阶段NAIFl的结构与功能研究打下了基础。 |
| 关 键 词： | 核凋亡诱导因子1 重组蛋白 蛋白纯化 大肠杆菌 |
| 文章编号： | 1000-484X（2006）11-0979-04 |
| 收稿时间： | 2006-05-04 |
| 修稿时间： | 2006-05-04 |
Expression and purification of truncated human recombinant nuclear apoptosis-inducing factor 1 in E. Coli |
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| HAN Pu,MO Xiao-Ning,ZHONG Li-Jun,YANG Bin,MA Da-Long,LOU Ya-Xin.Expression and purification of truncated human recombinant nuclear apoptosis-inducing factor 1 in E. Coli[J].Chinese Journal of Immunology,2006,22(11):979-982. | |
| Authors: | HAN Pu MO Xiao-Ning ZHONG Li-Jun YANG Bin MA Da-Long LOU Ya-Xin |
| Institution: | Peking University Center for Human Disease Genomics , Belting 100083, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | NAIF1 Recombinant protein Protein purification E coli |
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