锌对体外海马神经细胞MEK/ERK信号通路的调控作用研究

目的探讨锌对海马神经细胞MEK/ERK通路的调控机制。方法将原代培养乳鼠海马神经细胞分为3组。(1)对照组(Control组):不加任何处理因素。(2)四吡啶甲基乙二胺N,N,N',N'-tetrakis(2-pyridylmethyl)ethylenediamine,TPEN]干预组(TPEN组):2μmol/L TPEN处理海马神经细胞24h,以诱导海马神经细胞缺锌。(3)TPEN+5μmol/L Zn组:同时加入终浓度为2μmol/L TPEN及5μmol/L的Zn SO4。采用Western-Blot法检测pMEK,perk,Total-MEK、Total-ERK蛋白表达;免疫荧光法检测细胞内Ca~(2+)]_i浓度;分子探针DCFH-DA检测细胞内活性氧(ROS)含量。结果 (1)与对照组比较,TPEN组海马神经细胞上清液中LDH活性明显升高(P0.05);加入5μmol/L Zn后LDH活性显著降低(P0.05)。(2)与对照组比较,TPEN组pMEK及pERK蛋白表达均明显下降(P0.05);5μmol/L Zn可明显抑制TPEN诱导的海马神经细胞pMEK及pERK蛋白表达的降低(P0.05)。(3)与对照组比较,TPEN组细胞内Ca~(2+)]_i浓度及ROS水平明显升高(P0.05);5μmol/L Zn能明显抑制细胞内Ca~(2+)]_i及ROS水平的升高(P0.05)。结论缺锌可下调海马神经细胞MEK/ERK信号通路,其作用机制可能与细胞内Ca~(2+)]_i及ROS的调控有关。