p53通过促进miR-145的表达抑制肺腺癌A549细胞的干细胞特性

目的： 探讨P53 抑制肺腺癌A549细胞干细胞特性及其机制。方法： 收集2014年3月至2015年12月解放军第85医院胸外科手术切除的30例非小细胞肺癌（non-small cell lung carcinoma, NSCLC）患者癌组织及癌旁组织，采用Real-time PCR检测NSCLC组织和癌旁组织中miR-145的表达。构建人P53 基因的真核表达载体（pcDNA3.1-P53）和突变载体\pcDNA3.1-P53 R273H(CGT-CAT)\]，设计靶向P53基因的siRNA，分别转染A549细胞；细胞分为对照转染组（Vector或NC-siRNA）和实验组（Flag-P53或P53-siRNA）；Western blotting检测P53蛋白过表达和干扰效率，Real-time PCR检测OCT4和miR-145的表达，荧光双报告基因和Western blotting技术检测证实A549细胞中干细胞多能性调节基因（OCT4）为miR-145的靶标分子。结果： NSCLC组织中miR-145的表达水平明显低于癌旁组织\(2.31±0.13) vs (3.51±0.27)，P<0.01\]；P53明显促进A549细胞中miR-145的表达\(1.84±0.14) vs (1.00±0.00)，P<0.01\]；miR-145 mimics显著抑制A549细胞中pGL3-OCT4-3′-UTR活性(P<001)和OCT4蛋白表达水平(P<0.05)，而转染miR-145抑制剂可进一步增加OCT4表达水平，且逆转P53对A549细胞的干细胞特性的抑制作用。结论：P53通过促进miR-145表达下调OCT4表达，进而明显抑制A549细胞的干细胞特性，该结果为肺腺癌的临床诊断和治疗提供了新途径。

inhibits stem cell characteristics of lung adenocarcinoma A549 cells through regulating miR-145 expression