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红花二氢吡啶二羧酸合酶基因片段的分离及表达分析
引用本文:张玲,王艳芳,麦迪,张伟,胡振林,杨晶,杜林娜,孙天旭,雷锋杰,姚娜,李海燕,李校堃. 红花二氢吡啶二羧酸合酶基因片段的分离及表达分析[J]. 中草药, 2017, 48(2): 351-355
作者姓名:张玲  王艳芳  麦迪  张伟  胡振林  杨晶  杜林娜  孙天旭  雷锋杰  姚娜  李海燕  李校堃
作者单位:吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心, 吉林 长春 130118;吉林农业大学中药材学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学中药材学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学中药材学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心, 吉林 长春 130118;吉林农业大学生命科学学院, 吉林 长春 130118;吉林农业大学中药材学院, 吉林 长春 130118
基金项目:国家高技术研究发展(“863”)计划(2011AA100606);国家自然科学基金资助项目(31401445);吉林省科技厅医药产业推进计划项目(20140311034YY);教育部博士点基金(20122223120002)
摘    要:目的克隆红花Carthamus tinctorius赖氨酸合成途径关键酶二氢吡啶二羧酸合酶(dihydrodipicolinate synthase,DHDPS)基因并研究其在不同发育时期红花籽粒中的表达量。方法根据红花转录组文库注释信息筛选出与红花DHDPS(Ct DHDPS)基因相关的Unigenes,设计引物,以红花总RNA的反转录产物为模板,采用RT-PCR技术克隆Ct DHDPS基因片段,连接p EASY-T1克隆载体,经PCR和酶切鉴定,筛选阳性克隆并测序。同时利用荧光定量PCR技术对其在红花籽粒不同发育时期基因表达量进行分析。结果分离到长度为396 bp的Ct DHDPS基因片段,系统发育树分析表明该基因与其他物种的DHDPS基因具有较高的同源性。结论克隆了Ct DHDPS基因的核心片段,根据Ct DHDPS基因片段设计引物,对不同品种不同发育时期红花种子进行基因表达量分析,Ct DHDPS基因在红花品种川红1号初花后14 d表达量最高。

关 键 词:红花  二氢吡啶二羧酸合酶  基因克隆  同源性  荧光定量PCR
收稿时间:2016-09-13

Cloning and expression analysis on gene encoding dihydrodipicolinate synthase from Carthamus tinctorius
ZHANG Ling,WANG Yan-fang,MAI Di,ZHANG Wei,HU Zhen-lin,YANG Jing,DU Lin-n,SUN Tian-xu,LEI Feng-jie,YAO N,LI Hai-yan and LI Xiao-kun. Cloning and expression analysis on gene encoding dihydrodipicolinate synthase from Carthamus tinctorius[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2017, 48(2): 351-355
Authors:ZHANG Ling  WANG Yan-fang  MAI Di  ZHANG Wei  HU Zhen-lin  YANG Jing  DU Lin-n  SUN Tian-xu  LEI Feng-jie  YAO N  LI Hai-yan  LI Xiao-kun
Affiliation:Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development, Ministry of Education, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Traditional Chinese Medicine, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development, Ministry of Education, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Traditional Chinese Medicine, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development, Ministry of Education, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development, Ministry of Education, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development, Ministry of Education, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Traditional Chinese Medicine, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development, Ministry of Education, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development, Ministry of Education, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development, Ministry of Education, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Traditional Chinese Medicine, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China
Abstract:
Keywords:safflower  dihydrodipicolinate synthase  gene cloning  homology  real-time PCR
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