| 摘 要： | 目的探讨人体脂肪间充质干细胞生成胰岛素(insulin)分泌细胞的诱导方法及其对I型糖尿病大鼠的疗效评估。方法在人体腹部收集脂肪组织,通过酶消化法和物理震荡相结合分离脂肪干细胞;通过多种细胞因子的搭配诱导脂肪干细胞生成胰岛素分泌细胞。采用流式细胞仪分析、双硫腙染色鉴定脂肪干细胞和诱生的胰岛素分泌细胞;ELISA法检测诱导后细胞培养液上清中胰岛素分泌水平;通过流式细胞仪检测诱生细胞中胰十二指肠同源框因子-1(PDX1)、Insulin、C肽(C-Peptide)以及葡萄糖转运体-2(Glut-2)等相关基因的表达变化。建立I型糖尿病大鼠模型,随机分为模型对照组和模型实验组,对模型实验组大鼠进行干细胞治疗实验和疗效评估。结果脂肪间充质干细胞表面抗原主要表达CD13(90.4%),CD29(89.3%),CD44(91.9%),CD105(80.1%),而不表达CD34、CD45和HLA-DR。诱导分化后脂肪干细胞形成β细胞小簇,具有胰岛素分泌能力,鉴定显示胰岛素,C肽,Glut-2和PDX-1呈阳性。模型实验组大鼠经胰岛分泌细胞治疗2周后血糖明显降低,差异有统计学意义(P0.05),但两组大鼠体重变化差异无统计学意义(P0.05)。结论成功建立脂肪干细胞体外分离、培养的方法及其诱导向胰岛素分泌细胞定向分化的方法,为日后开展临床糖尿病的自体细胞移植治疗提供可靠的新的细胞来源和有效的细胞治疗方法。
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