GITR调控巨噬细胞自噬在铜绿假单胞菌感染中的作用

目的探讨糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)在铜绿假单胞菌(PA)感染中的作用。方法在小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞中过表达PSG5-GITR,PA感染、异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-Dextran)或Alexa Fluor 488荧光素标记的酵母多糖生物微粒处理。免疫荧光和蛋白印迹检测PA感染细胞中自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达,免疫荧光、平板计数试验或流式细胞术检测细胞吞噬能力。结果过表达PSG5-GITR促进PA感染后RAW264.7细胞LC3Ⅱ的表达,上调LC3斑点数量;抑制细胞对PA和FITC-Dextran的吞噬作用,下调吞噬溶酶体的数量;3-甲基腺嘌呤抑制自噬后,GITR抑制的RAW264.7细胞吞噬作用被有效回复。结论 GITR通过促进PA诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7自噬,从而抑制其吞噬功能。