PPARγ2基因重组腺病毒载体的构建与鉴定 |
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引用本文: | 吴永宏,毕扬,黄佳祎,吴明军,冯涛.PPARγ2基因重组腺病毒载体的构建与鉴定[J].重庆医学,2008,37(22):2556-2558. |
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作者姓名: | 吴永宏 毕扬 黄佳祎 吴明军 冯涛 |
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作者单位: | 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,400016;重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,400016;重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,400016;重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,400016;重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,400016 |
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基金项目: | 重庆医科大学创新基金资助项目(CX200521) |
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摘 要: | 目的 构建携带PPARγ2基因的腺病毒载体.方法 采用PCR技术从pcDNA3质粒中扩增小鼠PPARγ2基因,将PPARγ2基因亚克隆至质粒穿梭载体pAd-Track-CMV.用脂质体(lipid body)转染法(infection protocol)将重组腺病毒pAd-Track-PPARγ2-CMV和pAdEas-1共转染293细胞,确定转染效率.结果 RT-PCR检测结果显示腺病毒Ad-PPARγ2PCR产物约为470bp;用抗PPARγ2单克隆抗体进行Western blot检测为阳性,感染的重组腺病毒载体在L02细胞中PPARγ2有较高的稳定表达.结论 成功构建携带小鼠PPARγ2基因的腺病毒载体.
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关 键 词: | PPARγ2 腺病毒载体 克隆 |
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