| 中华眼镜蛇毒腺cDNA表达文库的建立和分析 |
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| 引用本文： | 万榕,宋军,林旭,林建银.中华眼镜蛇毒腺cDNA表达文库的建立和分析[J].第四军医大学学报,2004,25(13):1208-1211. |
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| 作者姓名： | 万榕 宋军 林旭 林建银 |
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| 作者单位： | 福建医科大学分子医学中心,福建,福州,350004;福建医科大学病理学系,福建,福州,350004;福建医科大学分子医学中心,福建,福州,350004 |
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| 摘 要： | 目的: 为研究开发眼镜蛇毒药用基因工程产品,筛选克隆及表达相关药用功能基因,构建中华眼镜蛇毒腺cDNA表达文库. 方法:一步法提取总RNA,Oligo(dT)纤维素层析柱纯化mRNA,逆转录PCR合成双链cDNA,分级分离除去小片段后,收集大于500 bp的cDNA片段,取10 ng cDNA与质粒载体pSPORT1连接、转化. 结果:获得克隆总数为2×105的眼镜蛇毒腺cDNA表达文库,重组率97%. 利用PCR技术从该文库扩增了心脏毒素-3(CTX-3)和磷脂酶A2(PLA2)基因的cDNA. 通过对文库克隆的序列测定和初步生物信息学分析,获得24个中华眼镜蛇毒腺EST序列. 结论:所建立的毒腺cDNA表达文库质量较高,可用于进一步筛选、克隆蛇毒药用功能新基因.
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| 关 键 词： | 中华眼镜蛇 毒腺 cDNA表达文库 PCR |
| 文章编号： | 1000-2790(2004)13-1208-04 |
| 修稿时间： | 2003年11月12 |
Construction of cDNA library from venom of Chinese Cobra |
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| WAN Rong ,SONG Jun ,LIN Xu ,LIN Jian Yin Molecular Medicine Research Center.Construction of cDNA library from venom of Chinese Cobra[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2004,25(13):1208-1211. |
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| Authors: | WAN Rong SONG Jun LIN Xu LIN Jian Yin Molecular Medicine Research Center |
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| Institution: | WAN Rong 1,2,SONG Jun 1,LIN Xu 1,LIN Jian Yin 1 1Molecular Medicine Research Center,2Department of Pathology,Fujian Medical University,Fuzhou 350004,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PCR |
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