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BrdU标记大鼠骨髓间充质干细胞增殖与成骨能力的变化
引用本文:冯进益,尤元璋,李 偏,蔡志刚,芮 钢.BrdU标记大鼠骨髓间充质干细胞增殖与成骨能力的变化[J].中国神经再生研究,2010,14(19):3421-3426.
作者姓名:冯进益  尤元璋  李 偏  蔡志刚  芮 钢
作者单位:福建医科大学附属厦门第一医院骨科,福建省厦门市 361003,福建医科大学附属厦门第一医院骨科,福建省厦门市 361003,福建医科大学附属厦门第一医院骨科,福建省厦门市 361003,福建医科大学附属厦门第一医院骨科,福建省厦门市 361003,福建医科大学附属厦门第一医院骨科,福建省厦门市 361003
基金项目:厦门市卫生局科研基金资助项目(WSK0610)
摘    要:背景:BrdU标记是一种标记率高、标记简便的标记物,但其毒性报道不一。 目的:观察BrdU标记对SD大鼠骨髓间充质干细胞增殖与成骨能力的影响。 方法:直接贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,0.2%Brdu标记后检测其增殖能力、克隆形成能力;经成骨诱导液诱导培养3周后,利用茜素红染色,荧光免疫组织化学和RT-PCR观测标记前后骨髓间充质干细胞成骨能力的变化情况。 结果与结论:Brdu标记后骨髓间充质干细胞克隆形成能力明显减弱,在克隆个数和面积上均小于正常对照组(P < 0.05);在增殖能力方面,BrdU标记后第4天开始进入对数增长期时增殖较慢,高峰较低(P < 0.05);在成骨能力方面,经成骨诱导后BrdU标记组与正常对照组的骨髓间充质干细胞均表达骨钙素、Ⅰ型胶原,并且都有明显的钙结节形成,RT-PCR检测显示标记前后骨髓间充质干细胞在骨钙素基因的表达方面差异无显著性意义(P > 0.05)。提示BrdU标记抑制骨髓间充质干细胞的克隆增殖形成能力,但不会降低其成骨分化能力,可以广泛应用于骨髓间充质干细胞作为种子细胞干细胞研究的示踪剂。

关 键 词:细胞示踪  BrdU  骨髓间充质干细胞  组织工程  Real  Time-PCR

Detection of changes in proliferation and osteogenic potentiality of rat bone marrow mesenchymal stem cells using BrdU labeling
Feng Jin-yi,You Yuan-zhang,Li Pian,Cai Zhi-gang and Rui Gang.Detection of changes in proliferation and osteogenic potentiality of rat bone marrow mesenchymal stem cells using BrdU labeling[J].Neural Regeneration Research,2010,14(19):3421-3426.
Authors:Feng Jin-yi  You Yuan-zhang  Li Pian  Cai Zhi-gang and Rui Gang
Institution:Department of Orthopaedics, Xiamen First Hospital Affiliated to Fujian Medical University, Xiamen 361003, Fujian Province, China,Department of Orthopaedics, Xiamen First Hospital Affiliated to Fujian Medical University, Xiamen 361003, Fujian Province, China,Department of Orthopaedics, Xiamen First Hospital Affiliated to Fujian Medical University, Xiamen 361003, Fujian Province, China,Department of Orthopaedics, Xiamen First Hospital Affiliated to Fujian Medical University, Xiamen 361003, Fujian Province, China,Department of Orthopaedics, Xiamen First Hospital Affiliated to Fujian Medical University, Xiamen 361003, Fujian Province, China
Abstract:
Keywords:
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