内质网应激和未折叠蛋白反应相关分子对儿童自身免疫性脑炎T淋巴细胞的影响

目的观察内质网应激(Endoplasmic ReticulumStress，ERS)对自身免疫性脑炎(Autoimmune Encephalitis，AE)病人 T淋巴细胞存活和凋亡的影响以及未折叠蛋白反应(Unfolded Protein Response，UPR)信号通路在 AE淋巴细胞存活和死亡中的作用。方法本研究在 2017年 2月至 2019年 2月选取石家庄市第一医院儿科 AE病人和健康供者外周血样本进行研究，并用不同浓度的毒胡萝卜素(Thapsigargin，TG)(浓度为 0、0.5、1、5、10 nM)分别处理 AE病人和健康供者的 T淋巴细胞 48 h，然后利用八肽胆囊收缩素(cholecystokinin octapeptide，CCK?8)实验方法检测细胞存活能力；用 TG(浓度为 5 nM)分别处理 AE病人和健康供者的 T淋巴细胞 48 h，流式细胞仪检测 TG未处理以及 TG处理的 T淋巴细胞的细胞凋亡情况； TG(浓度为 5 nM)刺激 AE病人和健康供者的 T淋巴细胞 48 h，蛋白质印迹法(Western blot)检测 UPR标志分子免疫球蛋白结合蛋白(BIP)和同源蛋白(CHOP)的蛋白表达水平以及凋亡相关蛋白 B淋巴细胞瘤 ?2(Bcl?2)、 B淋巴细胞瘤 ?XL(Bcl?XL)和 bcl?2相关 X蛋白(Bax)表达水平。结果 TG以剂量依赖性抑制 AE病人 T淋巴细胞的增殖，促进 AE病人 T淋巴细胞凋亡，并且使 AE病人 T淋巴细胞的 BIP(0.50±0.05)%比(0.23±0.04)%和抗凋亡蛋白 Bcl?2(1.41±0.04)%比(0.73±0.07)%、Bcl?XL(1.23±0.06)%比(0.51±0.05)%表达下调， CHOP(0.53±0.06)%比(0.81±0.07)%和促凋亡蛋白 Bax(0.51±0.01)%比(1.25±0.05)%的表达水平显著增加。结论内质网应激抑制 AE病人 T淋巴细胞的增殖，促进细胞凋亡，可能通过 BIP和 CHOP来影响细胞凋亡。

Effects of endoplasmic reticulum stress and unfolded protein response related molecules on T lymphocytes in children with autoimmune encephalitis