五味子乙素调控miR-22-3p/RUNX3分子轴对重症急性胰腺炎腺泡细胞损伤影响的研究

目的：探讨五味子乙素（Sch B） 调控miR-22-3p/runt 相关转录因子3（RUNX3） 分子轴对重症急性胰腺炎（SAP）腺泡细胞损伤的影响。方法：将大鼠胰腺腺泡细胞AR42J 分为Con 组、SAP 组、SAP+Sch-L 组、SAP+Sch-M 组、SAP+Sch-H组、SAP+anti-miR-NC 组、SAP+anti-miR-22-3p 组、SAP+Sch+miR-NC 组、SAP+Sch+miR-22-3p 组。除Con 组外，其余各组采用10 nmol/L 雨蛙素联合10 mg/L 脂多糖刺激AR42J 细胞24 h 构建SAP 细胞模型。SAP+Sch-L 组、SAP+Sch-M 组、SAP+Sch-H 组采用浓度为10、20、40 μmol/L 的Sch B 处理细胞；SAP+anti-miR-NC 组、SAP+anti-miR-22-3p 组为分别转染antimiR-NC、anti-miR-22-3p；SAP+Sch+miR-NC 组、SAP+Sch+miR-22-3p 组为分别转染miR-NC、miR-22-3p mimics 并用40 μmol/L的Sch B 干预。酶联免疫吸附法测定细胞培养液上清中白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α） 表达水平；流式细胞术检测细胞凋亡率；实时荧光定量PCR 检测miR-22-3p 和RUNX3 mRNA 表达水平；BCA 法检测RUNX3、B 细胞淋巴瘤-2 基因（Bcl-2）、Bcl-2 相关X 蛋白（Bax）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved-caspase3） 表达水平；双荧光素酶报告基因实验检测miR-22-3p 与RUNX3 的靶向结合关系。结果：与Con 组比较，SAP 组AR42J 细胞IL-6、TNF-α、miR-22-3p、Bax、cleaved-caspase3 的表达及细胞凋亡率升高（P＜0.05），RUNX3、Bcl-2 的表达降低（P＜0.05）。与SAP 组比较，SAP+Sch-L组、SAP+Sch-M 组、SAP+Sch-H 组IL-L、TNF-α、miR-22-3P、Bcl-2 表达降低（P＜0.05），Bax、cleaved-caspase3、RUNX3 表达及细胞凋亡率升高（P＜0.05），且呈剂量依赖性（P＜0.05）。与SAP+anti-miR-NC 组比较，SAP+anti-miR-22-3p 组细胞IL-6、TNF-α、Bcl-2 的表达降低（P＜0.05），细胞凋亡率及Bax、cleaved-caspase3、RUNX3 的表达升高（P＜0.05）。与SAP+Sch+miR-NC 组比较，SAP+Sch+miR-22-3p 组细胞IL-6、TNF-α、Bcl-2 的表达升高（P＜0.05），细胞凋亡率及Bax、cleavedcaspase3、RUNX3 的表达降低（P＜0.05）。结论：Sch B 可通过下调miR-22-3p/RUNX3 分子轴减轻SAP 腺泡细胞损伤。

Study on Effect of Schizandrin B Regulating MiR- 22- 3p/RUNX3 Molecular Axis onInjury of Acinar Cells with Severe Acute Pancreatitis