斑点酶免疫试验——一种简便、廉价和稳定的检测人类免疫缺陷症病毒(HIV)抗体的试验

将支持HIV连续生长的H9细胞培养上清液浓缩,用蔗糖密度梯度纯化病毒抗原;抗原以1∶250稀释后取2μl,点于硝酸纤维素膜上,室温干燥15分钟,用含0.5%Tween20和0.5%小牛血清的PBS封闭1小时,然后将膜放于24孔组织培养板的孔中,与1∶100稀释的被检血清1ml室温下培育1小时。用PBS、Tween和小牛血清液洗膜5次后,与过氧化物酶标记的羊抗人IgG反应1小时。膜经PBS洗5次后再与底物液培育5～10分钟,终止反应。在膜的反应位置上呈现棕色斑点为阳性结果。