| Toll 样受体4在成骨细胞共培养体系中对干细胞向破骨细胞分化的影响及机制 |
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| 引用本文： | 朱华荣,徐晓峰,陈奇,吴巍,魏长宝,曹学书. Toll 样受体4在成骨细胞共培养体系中对干细胞向破骨细胞分化的影响及机制[J]. 江苏大学学报(医学版), 2015, 0(3): 221-224,228 |
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| 作者姓名： | 朱华荣 徐晓峰 陈奇 吴巍 魏长宝 曹学书 |
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| 作者单位： | 江苏大学附属医院骨科;华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科 |
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| 摘 要： | 目的:探索Toll样受体(Toll like receptor,TLR)-4在成骨细胞共培养体系中对干细胞向破骨细胞分化的影响及机制。方法:Percoll密度梯度离心法分离原代大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),流式细胞术鉴定细胞表面标志物CD34、CD44、CD54、CD90。用Transwell小室建立干细胞(上室)-成骨细胞(下室)共培养体系,在此体系下对BMSCs进行破骨细胞诱导培养。将共培养体系分为TLR-4激活组和空白组,前者以TLR-4激动剂LPS(10 ng/m L)激活,后者加入等体积PBS。在诱导培养第6天,对上室细胞行抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色,计数并比较各组破骨细胞数。同时,蛋白质印迹检测各组下室细胞悬液中核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)的蛋白表达,观察电泳条带并行定量分析。结果:密度离心法获得原代大鼠BMSCs,流式细胞分析检测显示CD34阴性、CD44、CD54和CD90阳性。TRAP染色阳性细胞为破骨细胞,细胞计数显示,TLR-4激活组破骨细胞数明显多于空白组(t=13.556,P<0.05)。蛋白质印迹结果显示,TLR-4激活组RANKL的表达明显多于空白组(t=17.630,P<0.05)。结论:在成骨细胞共培养体系下,激活TLR-4能够促进BMSCs向破骨细胞分化,其机制可能与TLR-4促进成骨细胞分泌RANKL有关。
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| 关 键 词： | 干细胞 Toll样受体-4 破骨细胞 核因子κB受体活化因子配体 |
Effects and mechanism of Toll like receptor-4 in osteoclastgenesis of stem cells in co-culture system with osteoblast |
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| ZHU Hua-rong;XU Xiao-feng;CHEN Qi;WU Wei;WEI Chang-bao;CAO Xue-shu. Effects and mechanism of Toll like receptor-4 in osteoclastgenesis of stem cells in co-culture system with osteoblast[J]. Journal of Jiangsu University Medicine Edition, 2015, 0(3): 221-224,228 |
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| Authors: | ZHU Hua-rong XU Xiao-feng CHEN Qi WU Wei WEI Chang-bao CAO Xue-shu |
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| Affiliation: | ZHU Hua-rong;XU Xiao-feng;CHEN Qi;WU Wei;WEI Chang-bao;CAO Xue-shu;Department of Orthopedics,Affiliated Hospital of Jiangsu University;Department of Orthepeadic,Tongji Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology; |
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