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手工组织显微切割后的快速DNA提取技术
引用本文:唐泽立,罗泊涛,苏维勇,胡新荣,郑晓娟.手工组织显微切割后的快速DNA提取技术[J].中国组织工程研究与临床康复,2008,12(24):4677-4679.
作者姓名:唐泽立  罗泊涛  苏维勇  胡新荣  郑晓娟
作者单位:广东医学院病理学教研室,广东省湛江市,5240123
基金项目:广东省湛江市科技攻关项目
摘    要:目的:为寻找一种操作简便、结果稳定可靠的组织处理及切片染色技术,尝试应用组织切片手工显微切割后快速提取DNA的方法,观察提取的DNA质、量是否能满足后续分子水平研究的需要.方法:实验于2004-07/2007-07在广东医学院病理学实验室完成.取广东医学院附属医院病理科提供的子宫颈癌石蜡包埋组织切片,将切片贴于载玻片长时间完全脱蜡后,用苏木精对细胞核进行淡染,再在倒转置显微镜下进行显微切割,将切割下的组织放入装有提取缓冲液的EP管中,整个过程不需更换EP管,不经过复杂的酚一氯仿抽提,采用细胞裂解并蛋白酶K消化的方法,快速、简便提取DNA.结果:经分光光度计检测提取的DNA浓度为0.14~5.25 g/L,A260A280值在1.6-1.8i PCR检测扩增出了预期长度为231 bp的目的片段.结论:手工组织显微切割后快速DNA提取法可以提供足量浓度的DNA,PCR反应模板结果稳定可靠,可满足后续分子水平研究的需要.

关 键 词:组织固定  手工显微切割  蛋白酶K  DNA提取  组织  显微切割  快速  提取技术  specimen  technique  DNA  extraction  模板  反应  足量  长度  预期  浓度  检测  分光光度计  消化  蛋白酶  细胞裂解  抽提  氯仿

Rapid DNA extraction technique for the manual microdissectioned specimen
Tang Ze-li,Luo Bo-tao,So Wei-yong,Hu Xin-rong,Zheng Xiao-juan.Rapid DNA extraction technique for the manual microdissectioned specimen[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2008,12(24):4677-4679.
Authors:Tang Ze-li  Luo Bo-tao  So Wei-yong  Hu Xin-rong  Zheng Xiao-juan
Abstract:
Keywords:
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