荧光成像技术用于独活根中香豆素类成分积累规律研究

目的：建立独活冰冻切片的新方法，并利用荧光成像技术对不同时期独活根中的香豆素类成分进行组织化学定位、定量研究，明确独活中活性成分香豆素的组织分布及其动态积累规律。方法：以不同时期的独活根为材料，考察不同保护剂、不同切片厚度对独活根最佳制片的影响，以此建立独活根的最佳制片条件。此外，利用显微成像测量技术对不同部位分泌组织进行统计分析，并结合荧光成像对香豆素成分集中分布部位的荧光强度进行测算，以荧光强度对不同时期的独活根中香豆素成分进行相对定量研究，分析不同时期香豆素成分含量的动态变化规律。结果：独活根经15%甘油保护剂的处理，切片厚度为25 μm时切片效果最佳。通过组织化学定位显示，独活香豆素类成分主要分布在韧皮部的分泌腔及分泌道中。不同时期香豆素类成分总体变化趋势呈S形增长，8月、10月含量变化明显，10月香豆素含量达到最大。结论：首次使用了独活根冰冻切片及荧光成像新方法，研究了香豆素成分的产生、分布以及积累规律。发现独活香豆素成分主要分布在韧皮部的分泌腔中；不同时期独活根中香豆素成分动态积累变化趋势呈S形增长，且10月香豆素含量积累达到最大，为拓宽中药分析提供了新思路。

Accumulation Pattern of Coumarins in Angelica pubescens Root Based on Fluorescence Imaging