RNA干扰下调Slug表达对肺癌细胞A549的细胞周期、增殖和侵袭的影响

目的：应用RNA干扰技术下调肺癌A549细胞中Slug基因的表达，探讨其对A549细胞增殖、细胞周期和细胞侵袭能力的影响。方法：构建靶向Slug基因的shRNA真核表达质粒pGPU6-GFP-Neo-Slug，与阴性对照质粒pNeg-shRNA分别用脂质体法转染A549细胞。Real-time PCR和Western blotting验证转染后Slug mRNA和蛋白的表达。CCK-8法、流式细胞术和Transwell实验分别检测下调Slug表达对A549细胞增殖、细胞周期和侵袭能力的影响。结果：成功构建pGPU6-GFP-Neo-Slug载体并转染A549细胞，转染率达90%。与pNeg-shRNA组和空白对照组相比，pSlug-shRNA组A549细胞中Slug mRNA\（0.23±0.01）vs（0.97±0.08）、（1.0±0.09），P＜0.05\]和蛋白\（0.20±0.09 ）vs（1.0±0.32）、（1.13±0.26），P＜0.05\]表达量显著降低；细胞增殖抑制率明显上升\（35.3±5.4）% vs（1.5±0.2）%、（3.3±0.7）%，均P< 0.01\]；细胞增殖指数显著降低 \（32.92±0.69）% vs（48.19±0.71）%、（42.88±0.75）%，均P<0.05\]，并且处于G1期细胞数明显增多\（67.08±092）% vs（52.81±0.78）%、（56.12±0.73）%，均P<0.05\]；细胞侵袭能力显著降低\穿透基底膜细胞数：（55±9）vs（169±12）、（173±15），均P<0.01\]。结论: pGPU6-GFP-Neo-Slug转染肺癌A549细胞能有效下调Slug基因的表达，从而抑制A549的增殖侵袭能力、阻滞细胞周期于G1期。