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| 真核表达质粒pcDNA3.1(+)-rmCGβ的构建和鉴定 | |
| 引用本文： | 许铁峰,汪良,夏立平,陈兴,阎瑾琦,于继云.真核表达质粒pcDNA3.1(+)-rmCGβ的构建和鉴定[J].重庆医学,2009,38(13). |
| 作者姓名： | 许铁峰 汪良 夏立平 陈兴 阎瑾琦 于继云 |
| 作者单位： | 1. 海南医学院肿瘤研究所附属医院肿瘤外科,海口,570102;军事医学科学院基础医学研究所疫苗工程研究室,北京,100850 2. 苏州大学附属第一医院普通外科,235300 3. 海南医学院肿瘤研究所附属医院肿瘤外科,海口,570102 4. 军事医学科学院基础医学研究所疫苗工程研究室,北京,100850 |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，海南省教育厅资助项目 |
| 摘 要： | 目的 构建恒河猴绒毛膜促性腺激素β亚基(macaca mulatta chorionic gonadotrophin β subunit,rmCGβ)基因真核表达质粒pcDNA3.1(+)-rmCGβ,并了解该质粒能否在真核细胞中表达.方法 通过PCR扩增rmCGβ的全段基因cDNA,应用基因工程技术将扩增的cDNA克隆至PGM-Teasy,测序后插入pcDNA3.1(+)真核表达质粒,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-rmCGβ,经限制内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,用脂质体转染技术转染B16细胞,通过RT-PCR扩增出B16/pcDNA3.1(+)-rmCGβ细胞株中rmCGβ全段基因cDNA.结果 经4轮PCR,成功扩增出rmCGβ的cDNA全长基因,酶切和测序证明正确构建了真核表达质粒pcDNA3.1(+)-rmCGβ,通过RT-PCR方法 证实该质粒能在B16真核细胞中正确表达.建立了稳定的细胞株B16/pcDNA3.1(+)-rmCGβ.结论 成功克隆和构建了rmCGβ的真核表达质粒载体pcDNA3.1(+)-rmCGβ,为进一步研究rmCGβ的新功能和免疫治疗奠定了基础. |
| 关 键 词： | 恒河猴绒毛膜促性腺激素β亚基 质粒 真核表达 肿瘤疫苗 |
Construction and determination of a recombinant eukaryotic plasmid pcDNA3.1(+)-rmCGβ |
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| XU Tie-feng,WANG Liang,XIA Li-ping,et al..Construction and determination of a recombinant eukaryotic plasmid pcDNA3.1(+)-rmCGβ[J].Chongqing Medical Journal,2009,38(13). | |
| Authors: | XU Tie-feng WANG Liang XIA Li-ping |
| Institution: | XU Tie-feng1,3,WANG Liang2,XIA Li-ping1,et al.(1.Cancer Institute of Hainan Medical College,Affiliated Hospital of Hainan Medical College,Haikou 570102,China,2.General Surgery Department,The First Affiliated Hospital of Suzhou University,Suzhou 235300,3.Institute of Basic Medical Research Vaccine Works,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100850,China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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