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结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药相关蛋白的原核表达及纯化
引用本文:李辉,石洁,马晓光,赵玉玲,闫国蕊,邢进,张颖. 结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药相关蛋白的原核表达及纯化[J]. 中国病原生物学杂志, 2012, 0(9): 665-668
作者姓名:李辉  石洁  马晓光  赵玉玲  闫国蕊  邢进  张颖
作者单位:河南省疾病预防控制中心;约翰霍普金斯大学
摘    要:目的构建结核分枝杆菌pncA基因的原核表达质粒,获得结核分枝杆菌吡嗪酰胺酶的表达蛋白。方法制备结核分枝杆菌基因组DNA,采用聚合酶链反应扩增目的基因片段;通过pET28a构建表达载体pET28a-pncA,序列测定证实正确后转化大肠埃希菌DH10b,经IPTG诱导表达His-吡嗪酰胺酶融合蛋白,采用SDS-PAGE和Western blot分析重组蛋白。结果扩增出结核分枝杆菌pncA基因并构建了具有正确基因序列的质粒载体pET28a-pncA,转化大肠埃希菌BL21后经诱导产生了分子质量单位约20ku的表达产物,并得到纯化的带His标签的目的蛋白。结论构建了结核分枝杆菌pncA基因原核表达质粒,并诱导表达了His-吡嗪酰胺酶融合蛋白,为进一步研究吡嗪酰胺耐药性奠定了基础。

关 键 词:结核分枝杆菌  pncA基因  PZA耐药  吡嗪酰胺酶  原核表达

Prokaryotic expression and purification of Mycobacterium tuberculosis protein resistant to PZA
LI Hui,SHI Jie,MA Xiao-guang,ZHAO Yu-ling,YAN Guo-rui,XING Jin,ZHANG Ying. Prokaryotic expression and purification of Mycobacterium tuberculosis protein resistant to PZA[J]. Journal of Pathogen Biology, 2012, 0(9): 665-668
Authors:LI Hui  SHI Jie  MA Xiao-guang  ZHAO Yu-ling  YAN Guo-rui  XING Jin  ZHANG Ying
Affiliation:(Henan Province Center for Disease Control and Prevention,Zheng zhou 450016 China;Johns Hopkins University,Baltimore,MD 21205,USA)
Abstract:
Keywords:
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