| EBV-LMP1 C端RNA的体外转录合成及其靶脱氧核酶的初步筛选 |
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| 引用本文： | 杨玉成,王袆琴,钱迪,何芸,黄江菊,洪苏玲.EBV-LMP1 C端RNA的体外转录合成及其靶脱氧核酶的初步筛选[J].第三军医大学学报,2006,28(24):2426-2429. |
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| 作者姓名： | 杨玉成 王袆琴 钱迪 何芸 黄江菊 洪苏玲 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科,重庆,400016 |
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| 摘 要： | 目的 探讨用体外转录方法制备EBV-LMP1 C端RNA并用该RNA对其靶脱氧核酶进行初步筛选.方法 用巢式PCR方法从绒猴淋巴细胞系B95-8细胞中扩增EBV-LMP1 exon c,重组入pGEM-11zf载体,并用T7RNA聚合酶对其进行体外转录制备EBV-LMP1 C端RNA.根据该RNA的一、二级结构设计合成3种靶向10～23脱氧核酶,据体外剪切效率筛选高效特异的靶向脱氧核酶.结果 成功地构建含EBV-LMP1 exon c基因的重组质粒,用体外转录方法用1 μg质粒转录出40.25 μg高纯度的EBV-LMP1 C端RNA,有1种脱氧核酶DZ1对该RNA体外剪切效率达89%.结论 用T7RNA聚合酶体外转录方法成功制备了高纯度的EBV-LMP1 C端RNA,经体外剪切筛选出高效特异的1种脱氧核酶,为进一步研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 体外转录 EB病毒 潜伏膜蛋白1(LMP1) 脱氧核酶 |
| 文章编号： | 1000-5404(2006)24-2426-04 |
| 修稿时间： | 2005年12月27 |
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