| 摘 要： | 目的 观察电针预处理对大脑中动脉栓塞（MCAO）小鼠脑微血管内皮细胞功能的影响,并进一步探讨miRNA-155靶向阴阳因子1（YY1）/p53通路在电针预处理调节MCAO小鼠脑微血管内皮细胞功能中的作用。 方法 按随机数字表法将42只小鼠随机分为假手术组、模型组、电针预处理组、miR-155抑制剂组（电针预处理联合miR-155抑制剂处理）、miR-155激动剂组（电针预处理联合miR-155激动剂处理）、miR-155抑制剂阴性对照组（电针预处理联合miR-155抑制剂阴性对照处理）和miR-155激动剂阴性对照组（电针预处理联合miR-155激动剂阴性对照处理）,每组6只小鼠。电针预处理组、miR-155抑制剂组、miR-155激动剂组、miR-155抑制剂阴性对照组和miR-155激动剂阴性对照组均接受电针预处理,假手术组和模型组不接受任何预处理。miR-155抑制剂组、miR-155激动剂组、miR-155抑制剂阴性对照组和miR-155激动剂阴性对照组于电针预处理结束后,且造模前2 h进行对应的侧脑室注射。7组小鼠均于电针预处理最后1次治疗结束48 h后进行MCAO模型制作。于造模成功24 h和72 h后,采用改良神经功能缺损评分（mNSS）评估模型组、假手术组和电针预处理组小鼠的神经功能缺损程度。mNSS评分结束后对7组小鼠取材。采用苏木精伊红（HE）染色法观察缺血区脑组织的损伤情况;采用原位末端转移酶标记技术（TUNEL）染色法观察内皮细胞的凋亡情况;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测模型组、假手术组和电针预处理组血清中细胞间粘附分子-1（ICAM-1）的水平;采用免疫荧光检测脑微血内皮细胞凋亡数及ICAM-1、Bcl-2、Bax阳性细胞数;采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR)检测法检测I/R区miRNA-155、YY1、p53表达水平。 结果 造模成功24 h和72 h后,电针预处理组的mNSS评分分别为（6.17±1.17）分和（4.00±0.63）分,均显著低于模型组同时间点,差异均有统计学意义（P<0.05）。HE染色结果显示,电针预处理组造模成功24 h和72 h后的细胞形态较模型组更规则。TUNEL染色结果显示,电针预处理组造模成功24 h和72 h后的凋亡细胞数量显著低于模型组同时间点（P<0.05）。ELISA检测结果显示,电针预处理组造模成功24 h和72 h后的ICAM-1表达显著低于模型组同时间点（P<0.05）。免疫荧光检测结果显示,电针预处理组造模成功24 h和72 h后ICAM-1的相对表达量显著低于模型组同时间点（P<0.05）;电针预处理组造模成功24 h和72 h后的Bax/Bcl-2比值显著低于模型组。qRT-PCR检测结果显示,电针预处理组造模成功24 h和72 h后的miRNA-155、YY1、p53的相对表达量显著低于模型组同时间点。miR-155抑制剂组造模成功24 h和72 h后miRNA-155的表达量显著低于miR-155抑制剂对照组同时间点（P<0.05）;miR-155抑制剂组造模成功24 h和72 h后p53的表达量显著低于miR-155抑制剂对照组同时间点（P<0.05）。免疫荧光检测结果显示,miR-155抑制剂组造模成功24 h和72 h后ICAM-1表达量显著低于miR-155抑制剂对照组同时间点（P<0.05）;miR-155抑制剂组造模成功24 h和72 h后的Bax与Bcl-2比值显著低于miR-155抑制剂对照组同时间点（P<0.05）。 结论 电针预处理可以改善脑缺血再灌注小鼠的脑微血管内皮细胞功能,并可能通过下调miRNA-155介导的YY1/p53通路来减轻脑缺血再灌注损伤小鼠脑微血管内皮细胞的损伤。
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