肢体缺血-再灌注大鼠应用氨基胍后脑、肝脏及肾脏HO-1表达的变化

目的探讨大鼠肢体缺血-再灌注(I-R)时,脑、肝脏及肾脏组织内高表达的iNOS-NO是否对诱导型血红素氧合酶(HO-1)表达具有诱导作用.方法对肢体I-R大鼠应用氨基胍(AG)抑制iNOS后,用RT-PCR及免疫组化染色法观测其脑、肝及肾组织HO-1mRNA及蛋白表达的变化.SD大鼠随机分为I-R6h+AG、I-R12h+AG两个实验组及I-R6h、I-R12h两个对照组.通过夹闭大鼠双侧股动脉根部4h、开放6h或12h,制备肢体I-R6h、I-R12h组模型,I-R6h+AG、I-R12h+AG组于去夹再灌注前20min经腹腔注射AG(10mg/kg).结果(1)I-R6h组脑组织HO-1mRNA的相对表达量为0.645±0.049,I-R6h+AG组较前者显著下降(P＜0.01),为0.143±0.008;I-R12h组为0.808±0.016,I-R12h+AG组为0.329±0.014,I-R+AG组较前者显著下降(P＜0.01),为0.412±0.025.I-R12h组为1.116±0.085,I-R12h+AG组为0.870±0.040,两者比较,P＜0.01.(2)I-R6h组肝组织HO-1mRNA的相对表达量为0.605±0.014,两者相比,P＜0.01.(3)I-R6h组肾组织HO-1mRNA的相对表达量为0.706±0.042,I-R6h+AG组为0.286±0.052,两者相比,P＜0.01;I-R12h组为1.668±0.065,I-R12h+AG组较前者显著升高(P＜0.01),为3.176±0.109.(4)免疫组化染色显示,脑、肝及肾组织内HO-1蛋白生成的变化与mRNA表达的变化一致.讨论与结论在肢体I-R的情况下,脑等远隔多器官的iNOS及HO-1均表达上调,抑制iNOS活性使这些器官的HO-1表达水平显著下降,提示,在肢体I-R的状态下,远隔多器官高表达的iNOS-NO对HO-1基因表达具有上调性诱导作用.肾有别于脑与肝脏,应用AG12h后,肾血管内堆积大量破坏的红细胞,而血红素是HO-1表达的强效诱导剂,I-R12h+AG组肾HO-1表达上调可能是血红素的上调性诱导作用逆转了AG对HO-1的下调作用.