干扰素调节因子4在B细胞淋巴瘤细胞株中表达及其与细胞耐药的关系

背景：干扰素调节因子4是B细胞终末分化的重要转录因子，限制性表达于淋巴细胞，在基因调控中起重要作用，但其与疾病预后的最终关系仍未确定。 目的：假设干扰素调节因子4在B淋巴细胞中的表达与细胞耐药有关，观察新型抗肿瘤药蛋白酶体抑制剂硼替佐米对干扰素调节因子4的影响。 设计、时间及地点：细胞学体外实验，于2006—03／2007—02在河南省肿瘤医院中心实验室完成。 材料：Daudi和Namalwa细胞株由上海血液学研究所提供。阿霉素为山西普德药业有限公司产品，硼替佐米为西安杨森公司产品。 方法：将Daudi和Namalwa细胞各自接种于200μL RPMI-1640培养体系中，分别加入0，5，10，20，30，50，100μg/L阿霉素；对于Namalwa细胞，另设立联合用药组，即15nmol/L硼替佐米＋上述各浓度阿霉素；药物处理48h后，加入MTT继续培养。选择单药50μg/L阿霉素、15nmol/L硼替佐米以及两药联合作用Namalwa细胞12，24，48，72h，行半定量RT-PCR和Westem印迹分析。 主要观察指标：干扰素调节因子4在细胞株中的表达。MTT法检测细胞增殖抑制率。AnnexinV／PI法检测细胞凋亡情况。药物对Namalwa细胞干扰素调节因子4基因和蛋白表达的影响。 结果：Namalwa细胞表达干扰素调节因子4基因和蛋白，Daudi细胞中未检测出其表达。各浓度阿霉素作用48h后，Daudi细胞增殖抑制率显著高于Namalwa细胞（P〈0．05）；阿霉素联合硼替佐米共培养48h，Namalwa细胞增殖抑制率显著高于单药阿霉素（P〈0．05）。硼替佐米、阿霉素联合硼替佐米作用48h细胞凋亡率显著高于单药阿霉素（P〈0．01）。单药阿霉素处理12，24，48，72h，干扰素调节因子4基因和蛋白均未发生明显变化：单药硼替佐米处理48h干扰素调节因子4基因表达开始下调，72h出现蛋白表达下调；两药联合处N24h即出现干扰素调节因子4基因表达下调，48h随之出现蛋白表达下调。 结论：Namalwa细胞中干扰素调节因子4的表达与阿霉素耐药有关，硼替佐米能够下调干扰素调节因子4的表达，克服阿霉素的耐药。

Correlation of interferon regulatory factor-4 expression to chemo-resistance in B-cell lymphoma cell lines