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| Rh抗原Fab抗体库的构建与筛选 | |
| 引用本文： | 陈琦,张嘉敏,张海燕,朱自严,李厚达.Rh抗原Fab抗体库的构建与筛选[J].细胞与分子免疫学杂志,2009,25(9). |
| 作者姓名： | 陈琦 张嘉敏 张海燕 朱自严 李厚达 |
| 作者单位： | 1. 扬州大学医学院生理学教研室,江苏,扬州,225001 2. 上海市血液中心,上海,200051 3. 苏州贝尔达生物医药科技有限公司,江苏,苏州,215004 |
| 基金项目： | 苏州市科技局自然科学基金 |
| 摘 要： | 目的:构建抗体库并筛选Rh抗原的Fab抗体.方法:收集5份血清中抗Rh抗体效价在1:256～512的人淋巴细胞, 提取RNA, 用多对引物PCR扩增VH、 Vκ、 Vλ基因, 并分别从pComb3xTT和pComb3xλ噬粒中扩增CH1、 Cκ、 Cλ, 通过重叠PCR, 构建重链Fd基因及完整的kappa、 Lamda轻链, 并进一步重叠PCR, 获得Fab抗体片段.Fab经酶切、连接并电转化到噬菌体抗体表达载体pComb3xSS中, 构建获得抗Rh的Fab抗体库, 经4轮Rh(-)/ Rh(+)红细胞阴/阳淘筛, 获得的阳性克隆分别进行血凝试验、 Western blot分析及测序鉴定.结果:构建获得总库容为7.4×106的Fab抗体库, 并从中筛选得到1株能特异结合Rh抗原的Fab抗体.结论:应用基因工程抗体技术, 成功获得了1株能与Rh(+)红细胞特异凝集的Fab抗体, 为制备能用于临床的特异性强、效价高, 并具有自主知识产权的Rh抗体打下基础. |
| 关 键 词： | Rh血型 基因工程抗体 噬菌体抗体库 |
Construction of Fab antibody against Rh antigen |
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| CHEN Qi,ZHANG Jia-min,ZHANG Hai-yan,ZHU Zi-yan,LI Hou-da.Construction of Fab antibody against Rh antigen[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2009,25(9). | |
| Authors: | CHEN Qi ZHANG Jia-min ZHANG Hai-yan ZHU Zi-yan LI Hou-da |
| Abstract: | |
| Keywords: | Fab |
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