| 狼疮性肾炎肾阴虚证cDNA消减文库的构建 |
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| 引用本文： | 李玉萍,罗仁,赵晓山,聂晓莉,李俊.狼疮性肾炎肾阴虚证cDNA消减文库的构建[J].四川中医,2006,24(3):22-24. |
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| 作者姓名： | 李玉萍 罗仁 赵晓山 聂晓莉 李俊 |
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| 作者单位： | 1. 南方医科大学附属南方医院中医科,广东,广州,510515
2. 广州中医药大学,广东,广州,510405 |
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| 基金项目： | 广东省中医药管理局资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:采用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术构建汉族人狼疮性肾炎(LupusNephritis LN)肾阴虚证cDNA消减文库。方法:选择汉族人LN且中医辨证为肾阴虚证的患者以及正常人作为其对照组,进行正向和消减杂交。采用Trizol一步法提取总RNA,用SMART(Switch Mechanism At 5 end of RNA Template)技术逆转录并扩增总cDNA,用RsaI酶切基因组cDNA成大小不等的片段,分别与两种不同的接头连接,进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将PCR产物与U载体连接,经蓝白斑筛选后,再用PCR方法插入片段筛选出阳性重组质粒,构建LN肾阴虚证消减文库。结果:用SSH方法筛选出了LN肾阴虚证的差异cDNA片段,得到了450个白色克隆,再经PCR方法快速筛选出阳性重组质粒,从而成功地构建了LN肾阴虚证的cDNA消减文库。结论:SSH技术能够快速有效地分离差异cDNA片段以构建LN肾阴虚证cDNA消减文库,为进一步筛选和克隆LN肾阴虚证相关基因奠定了基础。
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| 关 键 词： | 狼疮性肾炎 肾阴虚证 抑制性消减杂交 基因组消减文库 |
| 文章编号： | 1000-3649（2006）03-0022-03 |
| 收稿时间： | 11 26 2005 12:00AM |
| 修稿时间： | 2005-11-26 |
Establishing cDNA substractive library of kidney Ying deficiency of lupus nephyritis by Suppression substractive hybridization |
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| Li Yuping,Luo Ren,Zhao Xiaoshan,Nie Xiaoli,Li Jun.Establishing cDNA substractive library of kidney Ying deficiency of lupus nephyritis by Suppression substractive hybridization[J].Journal of Sichuan of Traditional Medicine,2006,24(3):22-24. |
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| Authors: | Li Yuping Luo Ren Zhao Xiaoshan Nie Xiaoli Li Jun |
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| Institution: | 1.Nanfan Hospital Southern medical univeresiey ( Guangzhou Guangdong 510515;2. Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine ( Guangzhou Guangdong 510515 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | lupus nephritis kidney ying deficiency syndrome suppression subtractive hybridization cDNA subtractive library |
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