C型凝集素1受体参与人中性粒细胞体外杀伤白念珠菌活性的实验研究

【摘要】 目的 探讨人中性粒细胞能否通过C型凝集素1受体（dectin-1）识别白念珠菌细胞壁不溶性β葡聚糖来介导体外杀伤白念珠菌的活性。 方法 100 mg/L β葡聚糖体外作用于中性粒细胞1、6、24 h后，实时荧光定量逆转录PCR分析dectin-1和Toll样受体2 mRNA表达水平。100 mg/L β葡聚糖体外分别刺激中性粒细胞15 min、2 h、6 h，或先用dectin-1抑制剂昆布多糖100 mg/L和50 mg/L预处理30 min后，再予100 mg/L β葡聚糖刺激2 h，微量培养板荧光分析法检测中性粒细胞H2O2释放水平。昆布多糖预处理的中性粒细胞与白念珠菌体外共培养后，检测菌落形成单位（CFU）。结果 β葡聚糖作用中性粒细胞1、6、24 h后，dectin-1 mRNA水平分别为2.8195 ± 0.1669、5.4859 ± 0.7244、3.6041 ± 0.5372，均明显高于空白对照组（均P < 0.01）。β葡聚糖刺激中性粒细胞15 min后H2O2水平为（64.55 ± 15.67） μmol/L，2 h时为（290.34 ± 30.56） μmol/L，6 h时为（208.54 ± 26.88） μmol/L，与空白对照组（22.05 ± 3.99） μmol/L比较，差异均有统计学意义（均P < 0.01）；100 mg/L和50 mg/L昆布多糖预处理组分别为（80.45 ± 22.41） μmol/L和（130.42 ± 44.55） μmol/L，与β葡聚糖刺激组相比，分别降低了73%和45%，差异均有统计学意义（P < 0.01）。昆布多糖能明显抑制中性粒细胞体外杀伤白念珠菌的活性（均P < 0.01）。 结论 Dectin-1参与人中性粒细胞分泌H2O2以及对白念珠菌杀灭活性，为过继性粒细胞转输治疗系统性念珠菌感染提供初步依据。 【关键词】 念珠菌，白色； 中性白细胞； β葡聚糖类； 外源凝集素类，C型； 过氧化氢