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| 神经元烟碱受体β2亚基基因克隆和原核细胞表达 | |
| 作者姓名： | 李前 洪孝庄 |
| 作者单位： | 军事医学科学院毒物药物研究所 |
| 摘 要： | 采用异硫氰酸胍－酚－氯仿抽提法从孵育至１２天的鸡胚视叶顶盖中提取ＲＮＡ。ｃｈｏｅｐｆｅｒ报道的序列设计引物，引物的５端添加ＥｃｏＲＩ和ＸｂａＩ酶切位点。通过逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）得到１．４８ｋｂ长的ＣＤＮＡ片段，用ＥｃｏＲＩ和ＸｂａＩ酶切ＣＤＮＡ后插入质粒ＰＵＣ１９。测序采用Ｓａｎｇｅｒ双氧终止法，结果与文献报道一致。将β基因克隆入ＰＢＶ２２０原核表达载体中，宿主菌经４２℃诱导，经ＳＤ |
| 关 键 词： | 神经元 烟碱受体 基因克隆 原核细胞 基因表达 |
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