| 抗人硫氧还蛋白-1单克隆抗体的制备与鉴定及初步应用 |
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| 作者姓名： | 唐文心 王建和 陈正望 陈孝平 |
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| 作者单位： | 华中科技大学生命科学与技术学院,生物物理与生物化学研究所,湖北,武汉,430074 |
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| 摘 要： | 目的:制备抗硫氧还蛋白-1(TRX-1)的单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定.方法:以原核表达的TRX-1为抗原免疫BALB/c小鼠,按常规方法进行细胞融合.采用有限稀释法和间接ELISA法克隆和筛选阳性杂交瘤细胞株,用ELISA检测mAb腹水的效价、相对亲和力和进行表位分析,用Western blot法对mAb的特异性进行鉴定.结果:得到筛选出3株能稳定分泌抗TRX-1的杂交瘤细胞株B6、D5和E3,免疫球蛋白亚类均为IgG>(к),腹水mAb效价均在106以上,3株抗体分别针对不同抗原表位.用mAb建立的竞争抑制ELISA灵敏度达1.22 μg/L.结论:获得3株特异性好、亲和力高、能稳定分泌抗TRX-1的杂交瘤细胞株,为研究TRX-1在人类细胞、血液、组织中的表达及定位提供了可能,并为探索相关炎症、癌症发病机制及新治疗方法提供了强有力的工具.
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| 关 键 词： | 人硫氧还蛋白-1 单克隆抗体 竞争抑制ELISA 人硫氧还蛋白 单克隆抗体 制备与鉴定 治疗方法 发病机制 癌症 炎症 相关 定位 表达 组织 血液 细胞 人类 研究 亲和力 株特异性 灵敏度 竞争抑制 抗原表位 |
| 文章编号： | 1007-8738(2008)06-0597-04 |
| 修稿时间： | 2007-11-19 |
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