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稳定表达TRPA1通道的HEK-293T细胞模型的建立
引用本文:黄娟,明露,陈艳芬,唐春萍,张玉英,杨超燕. 稳定表达TRPA1通道的HEK-293T细胞模型的建立[J]. 中国药理学通报, 2019, 0(3): 440-443
作者姓名:黄娟  明露  陈艳芬  唐春萍  张玉英  杨超燕
作者单位:1.广东药科大学中药学院;2.广东药科大学广州市新药筛选模型体系构建与应用重点实验室;3.广东药科大学生命科学与生物制药学院
基金项目:国家自然科学基金资助项目(No 81302894);广东省自然科学基金资助项目(No S2012040006768)
摘    要:目的建立稳定表达TRPA1的HEK-293T细胞模型,并鉴定模型构建是否成功。方法构建TRPA1真核表达质粒,采用脂质体转染法将其转入HEK-293T细胞中,经G418筛选稳定表达株,采用RT-PCR、免疫组化技术,检测HEK-293T细胞TRPA1基因的转录和蛋白的表达。结果经酶切、测序证明,TRPA1基因的真核重组表达质粒已成功构建;PCR、免疫组化检测结果表明,将此重组质粒转入HEK-293T细胞可稳定表达TRPA1基因。结论成功构建了能稳定表达TRPA1通道的HEK-293T细胞株,为体外研究TRPA1生理病理功能和筛选相关TRPA1通道调节剂奠定了基础。

关 键 词:TRPA1通道  克隆  HEK-293T细胞  脂质体转染  真核质粒  细胞模型

Establishment of HEK-293T cell model stably expressing TRPA1 channel
HUANG Juan,MING Lu,CHEN Yan-fen,TANG Chun-ping,ZHANG Yu-ying,YANG Chao-yan. Establishment of HEK-293T cell model stably expressing TRPA1 channel[J]. Chinese Pharmacological Bulletin, 2019, 0(3): 440-443
Authors:HUANG Juan  MING Lu  CHEN Yan-fen  TANG Chun-ping  ZHANG Yu-ying  YANG Chao-yan
Affiliation:(School of Traditional Chinese Medicine,Guangdong Pharmaceutical University,Guangzhou510006,China;Guangzhou Key Lab of Construction and Application of New Drug ScreeningModel Systems,Guangdong Pharmaceutical University,Guangzhou510006,China;School of Life Sciences and Biopharmaceutics,Guangdong Pharmaceutical University,Guangzhou510006,China)
Abstract:
Keywords:TRPA1 channel  cloning  HEK-293T cells  liposome transfection  eukaryotic plasmid  cell model
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