| 抗结缔组织生长因子小分子干扰RNA设计、合成及活性鉴定 |
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| 引用本文： | 李光明,史毅,李定国,谢青,徐芹芳,金由辛. 抗结缔组织生长因子小分子干扰RNA设计、合成及活性鉴定[J]. 肝脏, 2004, 9(3): 148-151 |
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| 作者姓名： | 李光明 史毅 李定国 谢青 徐芹芳 金由辛 |
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| 作者单位： | 200092,上海第二医科大学附属新华医院消化科;中国科学院上海生命研究院,生物化学与细胞生物学研究所,分子生物学国家重点实验室;上海第二医科大学附属瑞金医院感染科 |
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| 基金项目： | 上海第二医科大学博士点基金资助 |
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| 摘 要： | 目的 设计、合成及筛选高效抗肝纤维化关键基因———结缔组织生长因子 (CTGF)的小分子干扰RNA(siRNA)。方法 应用RNA设计软件 ,模拟SD大鼠CTGFmRNA二级结构 ,设计并合成针对CTGFmRNA 483、885及946位点的三对 2 1核苷酸 (nt)siRNA ,转染肝星状细胞系 (HSCT6) ,以空白及转染非特异siRNA(与CTGFmRNA无同源性的 2 1ntsiRNA)作为对照 ,应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测HSCT6细胞CTGFmRNA表达。结果 与对照相比 ,转染siRNA的HSCT6细胞CTGFmRNA明显下调 ,在 5 0～ 2 0 0nmol/L范围 ,CTGFmRNA下调幅度呈浓度依赖性增加 ,以 483siRNA 2 0 0nmol/L最显著 ,转染非特异siRNA的HSCT6细胞CTGFmRNA表达水平无明显变化。转染 483siRNA的HSCT6细胞 2 4、48及 72hCTGFmRNA分别较对照下调 91%± 2 %、65 %± 3 % (t =78.82 ,3 7.5 3 ,P均 <0 .0 1)和 10 %± 7% (t =2 .5 5 ,P =0 .0 6) ,在 2 4～ 72h范围 ,CTGFmRNA下调幅度呈时间依赖性降低。结论 成功筛选到能高效阻抑CTGF表达的 483siRNA ,其有效阻抑时间约 72h ,有望通过介导CTGFmRNA剪切而抑制肝纤维化的发生与发展 ,可发展为新一代防治肝纤维化的核酸药物
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| 关 键 词： | 结缔组织生长因子 小分子干扰RAN 肝星状细胞 |
| 修稿时间： | 2004-03-09 |
Design,synthesis and activity evaluation of small interfering RNA targeting connective tissue growth factor |
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| LI Guangming ,SHI Yi,LI Dingguo,et al.. Design,synthesis and activity evaluation of small interfering RNA targeting connective tissue growth factor[J]. Chinese Hepatology, 2004, 9(3): 148-151 |
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| Authors: | LI Guangming SHI Yi LI Dingguo et al. |
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| Affiliation: | LI Guangming *,SHI Yi,LI Dingguo,et al. *Department of Gastroenterology,Xinhua Hospital,Shanghai Second Medical University,Shanghai 200092,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Connective tissue growth factor Small interfering RNA Hepatic stellate cell |
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