cyclin E基因siRNA抑制K562细胞生长的研究

目的 应用RNAi技术，研究cyclin E基因小干扰RNA(siRNA)对K562细胞生长的抑制作用。方法 针对cyclin E mRNA设计siRNA序列，经PCR方法体外扩增，得到含有U6启动子以及siRNA序列的PCR产物．以Lipofectamine^TM 42000脂质体法转染K562细胞，分别设置为干扰组、阴性对照组以及空白对照组，转染48h后进行细胞计数、RT-PCR及通过PI染色进行流式细胞仪检测，观察其干扰效果。结果 干扰组与阴性对照组和空白对照组相比，活细胞计数减少约80％，G1期细胞百分比增高30％，细胞基本停止增殖。干扰组cyclin E mRNA表达明显减弱，相对阴性对照组及空白对照组，干扰组mRNA表达下降70％。阴性对照组与空白对照组无显著性差异。结论 应用RNAi技术可以有效地干扰cyclin E基因的表达，并进一步抑制细胞的生长，但对于干扰的长期有效性尚无实验结论，需通过长效表达载体实验验证．

Growth inhibition of K562 cells by cyclin E gene-specific small interfering RNA.