| SD大鼠角朊细胞分离培养及鉴定 |
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| 引用本文： | 杨亚冬,张文元,李颖,房国坚,张科技. SD大鼠角朊细胞分离培养及鉴定[J]. 医学研究杂志, 2013, 42(8): 48-51 |
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| 作者姓名： | 杨亚冬 张文元 李颖 房国坚 张科技 |
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| 作者单位： | 浙江省医学科学院生物工程研究所,杭州,310013 |
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| 基金项目： | 浙江省自然科学基金资助项目，浙江省医药卫生科学研究计划项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨SD大鼠角朊细胞的分离培养技术并鉴定,观察细胞生长情况.方法 采用中性蛋白酶(DispaseⅡ)和胰蛋白酶分离角朊细胞,加入含有10％胎牛血清的角质化细胞专用培养基(keratinocyte serum free,K-SFM)培养.用免疫组化法和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法进行鉴定.结果 角朊细胞生长缓慢,原代培养第5天开始出现细胞克隆,核大而圆,培养11天连成片,培养24天长满单层,细胞传代培养比较困难,很难贴壁,经摸索在培养第15天,细胞长满80％左右时即可传代,但一般传3代后就不能再传.大鼠角朊细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)染色,细胞质呈棕褐色,提示培养的细胞CK19阳性.大鼠角朊细胞标志RT-PCR检测整合素β1、CK14(cytokeratin 14)、CK10(cytokeratin 10)的mRNA表达均阳性.结论 用两种酶分离获得的大鼠角朊细胞活性好,降低成纤维细胞污染,用K-SFM培养基培养的细胞经鉴定具有角朊细胞特性,为皮肤组织工程的研究提供良好的种子细胞方面的实验数据.
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| 关 键 词： | 角朊细胞 CK19 CK10 CK14 整合素β1 RT-PCR |
Cultivation and Identification of Epidermal Keratinocytes from the Skion of Newborn Sprague Dawley Rats |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Keratinocytes Cytokeratin 19 Cytokeratin 10 Cytokeratin 14 Integrin β1 RT-PCR |
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