生物发光法快速检测细胞内三磷酸腺苷 |
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引用本文: | 郝巧玲,吕斌,周宜开,程光明. 生物发光法快速检测细胞内三磷酸腺苷[J]. 华中科技大学学报(医学版), 2005, 34(1): 61-64 |
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作者姓名: | 郝巧玲 吕斌 周宜开 程光明 |
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作者单位: | 1. 华中科技大学同济医学院公共卫生学院环境医学研究所,武汉,430030 2. 华中科技大学同济医学院附属协和医院心外科,武汉,430022 |
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基金项目: | *国家自然科学基金重大项目 (No. 39990570) |
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摘 要: | 目的建立检测细胞内三磷酸腺苷(ATP)含量的生物发光方法,并利用该方法检测红细胞和不同再灌注处理心肌细胞内ATP的含量。方法制备所需测定的细胞ATP提取液,采用荧光素一荧光素酶检测系统检测ATP含量,ATP的含量与系统中所发射的光子数成正比,发光强度越大,ATP含量越高,通过检测发光强度计算ATP的含量。结果通过对红细胞内ATP含量的测定,确定了测定细胞内ATP的最佳反应条件:pH=7.8,温度20~25℃,荧光素酶浓度3.0mg/ml。利用确定的最佳条件对各种不同处理的心肌细胞内ATP浓度进行了检测,ATP检测结果与心肌功能的实验观察结果符合。结论生物发光方法测定ATP含量方法简单、结果可靠,可以在短时间内得到检测结果,是一种检测细胞内ATP的有效方法。
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关 键 词: | ATP浓度 细胞内 含量 心肌细胞 三磷酸腺苷 红细胞 检测结果 生物发光法 荧光素酶 发光强度 |
修稿时间: | 2003-08-26 |
Rapid Detection of ATP Concentration in Cells Using Bioluminescence Method |
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Abstract: | |
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Keywords: | adenosine triphosphate bioluminescence luciferase-luciferin |
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