正常骨与软骨冷冻冻蚀范围及其致死的临界温度

目的:通过冷冻家兔双侧胫骨上端,观察冷冻对正常骨与软骨冻蚀范围及其致死的临界温度。为临床采用冷冻技术治疗肿瘤寻找适宜温度。方法:实验于1987-06/1988-06在中国医科大学基础实验室完成。正常成年灰色家兔30只。采用液氮单周期间接冷冻家兔双侧胫骨上端,并连续记录距离冷冻中心0.5cm,1.0cm,1.5cm不同点温度。术后3d取材。①判断细胞存活标准采用琥珀酸脱氢酶组织学染色方法:胞浆内存在均匀细小的兰色琥珀酸脱氢酶颗粒,表示细胞存活,记为阳性细胞。切片标本中,观察六个平面视野如存在1个阳性细胞以上的,记为阳性标本。②超微结构的变化用透射电镜观察。结果:进入结果分析实验兔30只。①细胞存活情况:骨细胞在0℃时约有半数死亡;在-1l℃至-20℃时有14%的存活可能;低于-2l℃时全部死亡。软骨细胞在-21℃时约半数死亡,而在-41℃以下才全部死亡;距冷冻边缘3.0cm的区域内无生存细胞。②超微结构的变化:皮质骨,骨细胞位于骨陷窝中,充实、饱满、核椭圆;而酶阳性标本在电镜下无完整结构,偶见陷窝内残存的胞核及碎片,无细胞器成份。关节透明软骨,软骨细胞完整细胞器丰富,病变最严重处关节表面粗糙不平,染色暗淡,细胞轮廓不清,软骨陷窝空虚;少数细胞偏于陷窝一侧,呈新月型,仅占陷窝面积的五分之一以下。半月板,病变严重处,全片观察,可见纤维断裂,无细胞结构,电镜下纤维短截,横纹消失,胸膜破裂,残片包绕胞核。结论:在模拟临床条件的状态下,发现-2l℃以下骨细胞全部死亡,在-1l℃至-20℃有14%的存活可能。冷冻对正常骨与软骨冻蚀范围及其致死的临界温度将为临床冷冻条件的选择提供实验基础。

Frozen necrotic dimension of normal bone and cartilage and the critical lethal temperature caused by cryosurgery