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siRNA对肝癌细胞中特异性异常表达FGFR3基因的抑制效应研究
引用本文:邱伟华,陈皓,沈柏用,杨卫平,李宏为. siRNA对肝癌细胞中特异性异常表达FGFR3基因的抑制效应研究[J]. 中华肝胆外科杂志, 2007, 13(10): 686-689
作者姓名:邱伟华  陈皓  沈柏用  杨卫平  李宏为
作者单位:上海交通大学医学院附属瑞金医院外科,上海市,200025
基金项目:本课题由国家自然科学基金课题(30500493),美国Ralph M Parsons Foundation(01-03)和上海市教育委员会课题(04BC32)资助
摘    要:目的设计和筛选有效抑制纤维母细胞生长因子受体3基因(FGFR3)表达的siRNA序列,构建相应表达载体,研究其对肝癌细胞HepG2生物学特性的影响。方法根据FGFR3序列,设计3条siRNA序列及1条对照序列:以pRNAT-U 6.1/Neo为载体,并以载体中同时构建的绿色荧光蛋白(GFP)基因编码序列为转染效率内参照;采用脂质体法将pRNAT-U 6.1/Neo-siRNA转染肝癌细胞HepG2;以实时荧光定量PCR(Real time PCR)检测FGFR3的mRNA表达变化,Western印迹法检测FGFR3蛋白质表达变化;[^3H]胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法(^3H-Tdr)和细胞克隆形成法分析DNA合成变化及细胞生长能力。结果所设计合成的3条siRNA序列中均能抑制FGFR3的表达,对mRNA表达抑制率约为74.04%~87.25%,在蛋白质水平表达抑制率为19.65%~90.40%。转染siRNA后,HepG2的细胞克隆形成能力和DNA合成能力明显受到抑制。结论siRNA能够有效抑制肝癌细胞FGFR3的表达,并继而抑制肝癌细胞的DNA合成和生长,能够为肝癌基因表达调控研究提供新的靶基因。

关 键 词:  肝细胞 FGFR3 siRNA
修稿时间:2006-12-18

Inhibitory effects of siRNA on specific abnormal expression of FGFR3 in hepatocellular carcinoma
QIU Wei-hua , CHEN Hao, SHEN Bo-yong,et al.. Inhibitory effects of siRNA on specific abnormal expression of FGFR3 in hepatocellular carcinoma[J]. Chinese Journal of Hepatobiliary Surgery, 2007, 13(10): 686-689
Authors:QIU Wei-hua    CHEN Hao   SHEN Bo-yong  et al.
Affiliation:Department of Surgery, Ruijin Hospital, Shang hai Jiaotong University, Shanghai 200025, P. R. China
Abstract:
Keywords:Carcinoma,hepatocellular   FGFR3   siRNA
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